24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1038  |  回复: 13

ding_winnie

无虫 (小有名气)


[交流] PCR实验疑问

各位在做PCR的时候有没有出现过这样的情况,25ul体系可以得到很好的目的条带,但是同样的条件,50ul就不能得到目的条带。而且这样的情况并不是每次都会出现,只针对某些基因片段。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

asdkingstar

金虫 (正式写手)


★ ★
ding_winnie(金币+1): 谢谢参与
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-10-10 19:15:16
分子实验就是这样,第一次做可能有,但是第二次就没有,第三次还是没有,可是第4次又有了,它对条件要求很高,所以就会出现楼主这样的情况。随便更改个条件就会出现很多问题。
2楼2012-10-09 20:32:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

piaoyunokok

木虫 (正式写手)



ding_winnie(金币+1): 谢谢参与
确实好多分子实验都说不清楚的。楼主的反应体系就是对应加大的吗?也有可能是操作的问题,我也经常碰到类似情况。。。
3楼2012-10-09 21:05:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飞飞0123

新虫 (初入文坛)



ding_winnie(金币+1): 谢谢参与
我今天就出现同样问题了,第一次负对照出现条带了,第二次做又所有的没有条带了,真不知道哪出问题了唉
4楼2012-10-09 21:13:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

joan198108

铁杆木虫 (正式写手)



ding_winnie(金币+1): 谢谢参与
总体来说PCR是个简单的实验,但是却又很复杂,好多结果都不容易分析,难以找出原因,只能靠经验和推测,然后逆向验证
5楼2012-10-10 08:15:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)



ding_winnie(金币+1): 谢谢参与
这个我也遇到过,说不清原因。最后干脆就做25ul的了。如果PCR的效率不错的话回收克隆也够用了。
6楼2012-10-10 08:52:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

分子菜鸟

木虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
弄两个25不就是50了吗……
7楼2012-10-10 09:03:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

s20121113

铜虫 (正式写手)


路过,来学习一下!
8楼2012-10-11 08:43:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

静安jingan

铁杆木虫 (职业作家)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
哎,这个是个很郁闷的事情,明明前一次做得时候有么,下一次就没有了
9楼2012-10-11 22:35:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

佩琪

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我在做实验的过程中也发现,一般小体积比大体积的PCR效果要好,而且不同的PCR仪P出的效果也不一样~
10楼2012-10-12 16:22:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冬至1221

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
是的哇 如果50的P不出来就用25的
11楼2012-10-13 22:47:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ding_winnie

无虫 (小有名气)


引用回帖:
2楼: Originally posted by asdkingstar at 2012-10-09 20:32:02
分子实验就是这样,第一次做可能有,但是第二次就没有,第三次还是没有,可是第4次又有了,它对条件要求很高,所以就会出现楼主这样的情况。随便更改个条件就会出现很多问题。

是的呢~经常反复,但是总结额几次的经验,发现P不出来还是有原因的,所以做实验就是要总结各种经验~祝各位实验顺利!
12楼2012-12-28 10:55:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

清风寨

银虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我也遇到了 做了N次才发现25的能出来  郁闷死了 以后就只能做25的体系
13楼2012-12-28 13:24:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ding_winnie

无虫 (小有名气)


引用回帖:
13楼: Originally posted by 清风寨 at 2012-12-28 13:24:15
我也遇到了 做了N次才发现25的能出来  郁闷死了 以后就只能做25的体系

有可能是50ul体系大,传热不好,没太弄明白是怎么回事,反正25可以P出来就好了~祝实验顺利!~
14楼2012-12-28 14:21:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 学员RBKmYY 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 279求调剂 +10 j的立方 2026-03-29 10/500 2026-03-30 19:26 by markhwc
[考研] 322求调剂 +10 宋明欣 2026-03-27 10/500 2026-03-30 18:47 by 544594351
[考研] 292求调剂 +13 是妍子也是研子 2026-03-30 13/650 2026-03-30 18:01 by 小徐0109
[考研] 317分 一志愿南理工材料工程 本科湖工大 求调剂 +12 芋泥小铃铛 2026-03-28 12/600 2026-03-30 17:06 by wangjy2002
[考研] 071010 323 分求调剂 +3 Baekzhy 2026-03-27 3/150 2026-03-30 14:24 by andresqi
[硕博家园] 求调剂 有机化学考研356分 +10 Nadiums 2026-03-25 11/550 2026-03-30 11:56 by yjolah
[考研] 材料科学与工程求调剂 +6 深V宿舍吧 2026-03-29 6/300 2026-03-29 20:51 by 唐沐儿
[考研] 学硕274求调剂 +9 Li李鱼 2026-03-26 9/450 2026-03-28 21:42 by bymhappy
[考研] 299求调剂 +7 嗯嗯嗯嗯2 2026-03-27 7/350 2026-03-28 13:09 by 唐沐儿
[考研] 286求调剂 +4 丢掉懒惰 2026-03-27 7/350 2026-03-28 08:07 by baoball
[考研] 材料求调剂 一志愿哈工大总分298分,前三科223分 +5 dongfang59 2026-03-27 5/250 2026-03-28 04:53 by wxiongid
[考研] 340求调剂 +5 jhx777 2026-03-27 5/250 2026-03-28 04:18 by fmesaito
[考研] 285求调剂 +4 AZMK 2026-03-27 7/350 2026-03-27 20:59 by AZMK
[考研] 274求调剂 +17 顾九笙要谦虚 2026-03-24 23/1150 2026-03-27 15:16 by caszguilin
[考研] 324求调剂 +5 hanamiko 2026-03-26 5/250 2026-03-27 10:33 by wangjy2002
[考研] 化学调剂一志愿上海交通大学336分-本科上海211 +4 小鱼爱有机 2026-03-25 4/200 2026-03-26 10:19 by aa331100
[考研] 347求调剂 +4 L when 2026-03-25 4/200 2026-03-25 13:37 by cocolv
[考研] 340求调剂 +5 话梅糖111 2026-03-24 5/250 2026-03-25 06:53 by ilovexiaobin
[考研] 生物学学硕求调剂 +7 小羊睡着了? 2026-03-23 10/500 2026-03-25 02:24 by 清风拂扬。 m
[考研] 080500求调剂 +3 zzzzfan 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:38 by barlinike
信息提示
请填处理意见