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ding_winnie

无虫 (小有名气)


[交流] PCR实验疑问

各位在做PCR的时候有没有出现过这样的情况,25ul体系可以得到很好的目的条带,但是同样的条件,50ul就不能得到目的条带。而且这样的情况并不是每次都会出现,只针对某些基因片段。
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飞飞0123

新虫 (初入文坛)



ding_winnie(金币+1): 谢谢参与
我今天就出现同样问题了,第一次负对照出现条带了,第二次做又所有的没有条带了,真不知道哪出问题了唉
4楼2012-10-09 21:13:18
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asdkingstar

金虫 (正式写手)


★ ★
ding_winnie(金币+1): 谢谢参与
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-10-10 19:15:16
分子实验就是这样,第一次做可能有,但是第二次就没有,第三次还是没有,可是第4次又有了,它对条件要求很高,所以就会出现楼主这样的情况。随便更改个条件就会出现很多问题。
2楼2012-10-09 20:32:02
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piaoyunokok

木虫 (正式写手)



ding_winnie(金币+1): 谢谢参与
确实好多分子实验都说不清楚的。楼主的反应体系就是对应加大的吗?也有可能是操作的问题,我也经常碰到类似情况。。。
3楼2012-10-09 21:05:41
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)



ding_winnie(金币+1): 谢谢参与
总体来说PCR是个简单的实验,但是却又很复杂,好多结果都不容易分析,难以找出原因,只能靠经验和推测,然后逆向验证
5楼2012-10-10 08:15:22
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