| 查看: 2581 | 回复: 9 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
weining1203新虫 (小有名气)
|
[求助]
关于pET-32a表达的一些问题
|
|
|
我的目的蛋白大概78Kd，使用pET-32a表达载体，酶切位点为sacI和Xhol， 上游引物 5G GAGCTC（SacI）ATGGTTGCAGCAGCAGAAAT3 下游引物 5CCG CTCGAG（Xhol）TCAGAATGGGCCAGGAGTTC3 设计的引物上游有起始密码子，下游有终止密码子，那么最终表达的蛋白到底有多大呢？求大神指点 |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有96人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- PET-32a双酶切无法回收
已经有8人回复
- 原核表达 pET32a和pET30a Western blot问题
已经有9人回复
- pET-28a原核不能表达目的蛋白
已经有17人回复
- 目的蛋白序列连接pet15b测序结果正确为何不表达
已经有7人回复
- 含信号肽的序列能否在原核表达系统PET-32a中表达
已经有7人回复
- 【求助/交流】那位有载体PET32a的图谱
已经有5人回复
- 【专题】蛋白新纯化思路探讨
已经有26人回复
- 【求助/交流】如何提高PET表达系统的蛋白表达量
已经有22人回复
【答案】应助回帖
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-10-12 15:46:09
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-10-12 15:46:09
| 楼上说得对，pET32载体上还有Trx.tag, S.tag, His.tag序列，根据pET系统的说明书，插入大小约为20.4 kDa，加上原来的78 kDa，大约100 kDa。 |
weining12037楼2012-10-11 18:27:02
Marado
金虫 (正式写手)
Dreamer
- MolEPI: 2
- 应助: 81 (初中生)
- 金币: 1458.8
- 散金: 100
- 红花: 1
- 帖子: 430
- 在线: 196.7小时
- 虫号: 1512351
- 注册: 2011-11-27
- 专业: 生物化学
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
| ……你都说你目的蛋白78kd了，那你表达出来的应该就是78kd+HIS标签的大小. |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
2楼2012-10-09 15:13:15
weining1203
新虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 9.9
- 散金: 5
- 帖子: 132
- 在线: 36.4小时
- 虫号: 1728956
- 注册: 2012-03-31
- 专业: 植物遗传学
3楼2012-10-09 15:42:44
Marado
金虫 (正式写手)
Dreamer
- MolEPI: 2
- 应助: 81 (初中生)
- 金币: 1458.8
- 散金: 100
- 红花: 1
- 帖子: 430
- 在线: 196.7小时
- 虫号: 1512351
- 注册: 2011-11-27
- 专业: 生物化学
4楼2012-10-09 15:56:54
