24小时热门版块排行榜    

查看: 2233  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

weining1203

新虫 (小有名气)

[求助] 关于pET-32a表达的一些问题

我的目的蛋白大概78Kd,使用pET-32a表达载体,酶切位点为sacI和Xhol,
上游引物 5G GAGCTC(SacI)ATGGTTGCAGCAGCAGAAAT3
下游引物 5CCG CTCGAG(Xhol)TCAGAATGGGCCAGGAGTTC3
设计的引物上游有起始密码子,下游有终止密码子,那么最终表达的蛋白到底有多大呢?求大神指点
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weining1203

新虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by Marado at 2012-10-09 15:56:54
加几个HIS取决于你用的载体.以6个His为例子,分子量是155*6=1KD...

谢谢
5楼2012-10-11 14:51:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
……你都说你目的蛋白78kd了,那你表达出来的应该就是78kd+HIS标签的大小.

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
2楼2012-10-09 15:13:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weining1203

新虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by Marado at 2012-10-09 15:13:15
……你都说你目的蛋白78kd了,那你表达出来的应该就是78kd+HIS标签的大小.

哦。。。 不太明白,加几个HIS,请说详细点,本人小白,谢谢您
3楼2012-10-09 15:42:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by weining1203 at 2012-10-09 15:42:44
哦。。。 不太明白,加几个HIS,请说详细点,本人小白,谢谢您...

加几个HIS取决于你用的载体.以6个His为例子,分子量是155*6=1KD

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
4楼2012-10-09 15:56:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 336求调剂 +3 收到VS 2026-03-20 3/150 2026-03-23 13:23 by Iveryant
[考研] 081700 调剂 267分 +4 迷人的哈哈 2026-03-23 4/200 2026-03-23 13:02 by ztnimte
[考研] 招08考数学 +5 laoshidan 2026-03-20 12/600 2026-03-23 12:38 by 梨花珞晚风
[考研] 306求0703调剂一志愿华中师范 +6 纸鱼ly 2026-03-21 6/300 2026-03-23 12:08 by Iveryant
[考研] 284求调剂 +6 Zhao anqi 2026-03-22 6/300 2026-03-23 09:23 by king123!
[考研] 310求调剂 +4 baibai1314 2026-03-16 4/200 2026-03-22 20:19 by edmund7
[考研] 考研调剂 +4 来好运来来来 2026-03-21 4/200 2026-03-22 12:15 by 星空星月
[考研] 297求调剂 +3 喜欢还是不甘心 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:33 by 学员8dgXkO
[考研] 268求调剂 +9 简单点0 2026-03-17 9/450 2026-03-21 15:37 by lature00
[考研] 华东师范大学-071000生物学-293分-求调剂 +3 研究生何瑶明 2026-03-18 3/150 2026-03-21 01:30 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:46 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +7 ^O^乜 2026-03-19 7/350 2026-03-20 21:43 by JourneyLucky
[考研] 材料学硕297已过四六级求调剂推荐 +11 adaie 2026-03-19 11/550 2026-03-20 21:30 by laoshidan
[考研] 材料学求调剂 +4 Stella_Yao 2026-03-20 4/200 2026-03-20 20:28 by ms629
[考研] 一志愿西安交通大学 学硕 354求调剂211或者双一流 +3 我想要读研究生 2026-03-20 3/150 2026-03-20 20:13 by JourneyLucky
[考研] 0856调剂,是学校就去 +8 sllhht 2026-03-19 9/450 2026-03-20 14:25 by 无懈可击111
[考研] 320求调剂0856 +3 不想起名字112 2026-03-19 3/150 2026-03-19 22:53 by 学员8dgXkO
[考研] 材料,纺织,生物(0856、0710),化学招生啦 +3 Eember. 2026-03-17 9/450 2026-03-18 10:28 by Eember.
[考研] 考研求调剂 +3 橘颂. 2026-03-17 4/200 2026-03-17 21:43 by 有只狸奴
[考研] 275求调剂 +4 太阳花天天开心 2026-03-16 4/200 2026-03-17 10:53 by 功夫疯狂
信息提示
请填处理意见