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银虫 (著名写手)

[求助] 如何设计引物扩增片段?做克隆的

已知 cdna序列和cds序列。
想设计引物:pcr扩增片段---回收片段,加A---与载体连接----转化--提质粒等
请问如何设计引物?是不是还要找到cds的  起始密码  终止密码之类?
谁能详细告诉我?初学者的困惑很痛苦啊
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银虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by lidonghong at 2012-09-29 15:49:21
是用sdna序列就可以了,加A需使用还有加A酶功能的dna扩增酶,有些酶扩增出来是不加A的,另外扩增后你可以直接连接到表达载体上就不需要加A了,另外起始密码和终止密码你一般最好含在里面,因为有些载体是不含有atg启 ...

能起个例子吗?非常感谢!
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5楼2012-09-29 16:18:26
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银虫 (著名写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by lidonghong at 2012-09-29 16:34:23
恩 酶我还真忘了 你仔细看看酶的使用说明书 上面都有...

能举个例子   做个引物设计的例子吗  嘿嘿
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7楼2012-09-29 16:39:19
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