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添翼如虎

新虫 (小有名气)

[交流] pGM-T载体连接条件 已有4人参与

PCR仪连接过夜的话温度和时间怎么设置啊？
水浴行不行呢
恒温培养箱的温度老降不下来啊，培养箱是不是不能低于室温呢？
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1楼 2012-09-23 21:00:49
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
嗯..................
       pGEM-T是Promage的那个载体吗？如果是的话我记得连接过夜是用4度的，我两次连长片段过夜连都是直接扔到4度冰箱的...............
       另：低于室温高于冰箱的连接就找循环水浴吧，不要用PCR仪，那样长时间的恒温对PCR仪是有害的。
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Let God do with it as He wills
2楼2012-09-23 22:10:42
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remax520

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
PCR仪可以连接过夜 但是对仪器的耗费比较大,一般不提倡 如果偶尔一次的话,勉强用用吧,其它的只要能稳定到你连接的温度一般是可以用的  我曾经用过水浴的方式.
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3楼2012-09-23 22:12:32
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kiruwa

专家顾问 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
4度冰箱过夜或者16度过夜都试过，效果不错。 室温过夜我觉得也没啥大问题。 我用过promega和invitrogen的kit，都取得了不错的效果。
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请注意,照片不是我本人!!!请不要把此人和我的长相联系到一起去.
4楼2012-09-24 11:07:38
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添翼如虎

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by kiruwa at 2012-09-24 11:07:38
4度冰箱过夜或者16度过夜都试过，效果不错。 室温过夜我觉得也没啥大问题。 我用过promega和invitrogen的kit，都取得了不错的效果。

我想用PCR仪16摄氏度过夜连接 可以吗？
有的人说PCR损耗比较大，对仪器不好是吗？我搜不知道怎么做了
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5楼2012-09-24 11:10:34
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foxcl

铁虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by 添翼如虎 at 2012-09-24 11:10:34
我想用PCR仪16摄氏度过夜连接 可以吗？
有的人说PCR损耗比较大，对仪器不好是吗？我搜不知道怎么做了...

我们一直ＰＣＲ仪来设１６度的。其它的温度控制不太精确哈。　　　
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6楼2012-09-24 11:13:48
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kiruwa

专家顾问 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by 添翼如虎 at 2012-09-24 11:10:34
我想用PCR仪16摄氏度过夜连接 可以吗？
有的人说PCR损耗比较大，对仪器不好是吗？我搜不知道怎么做了...

如果不care，当然可以，我们实验室有个16度的storage room，所以我一般放在那里。 如果那个room不工作，我就会放在冰箱里。 4度冰箱过夜的表现也是很不错的。
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7楼2012-09-24 11:19:17
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kiruwa

专家顾问 (职业作家)
引用回帖:
6楼: Originally posted by foxcl at 2012-09-24 11:13:48
我们一直ＰＣＲ仪来设１６度的。其它的温度控制不太精确哈。　　　...

链接温度影响不大，我16度，4度，17度，18度，都试过，没太大影响。
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请注意,照片不是我本人!!!请不要把此人和我的长相联系到一起去.
8楼2012-09-24 11:19:50
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添翼如虎

新虫 (小有名气)
好的 谢谢
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9楼2012-09-24 20:40:19
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