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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PRC出现大量非特异性条带
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Viegour

新虫 (初入文坛)

[交流] PRC出现大量非特异性条带 已有8人参与

做700多的PCR，出现的非特异性条带比特异性的还亮，咋整呢……
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1楼 2012-08-28 14:53:26
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616057157

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
看看Tap酶的量，主要是引物和退火温度的问题
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不曾拥有何谈失去，不必伤心！！！
4楼2012-08-28 16:02:03
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yaolinlshang

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我的实验也是这样。
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最是人间留不住，朱颜辞镜花辞树！
2楼2012-08-28 15:21:57
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三十不惑

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
amisking: 回帖置顶 2012-08-28 19:39:54
amisking: 金币+3, 鼓励发帖交流问题。 2012-08-28 19:40:02
我也碰到过，排除了很多问题，最终也没找到确切的原因，最后还是无奈换了引物，就没问题了。由此分析应该还是引物本身的问题，或者多个结合位点，或者非特异结合，也可能是引物自身出现多聚。我也对PCR结果进行了测序，就使用了PCR引物，但是测序公司说不能结合测不出来。我对这个问题也非常好奇，如果你能找到原因，一定要告诉我呵呵。
目前看来要想解决问题，最有效的还是直接更换引物。
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个性签名
3楼2012-08-28 15:36:28
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lidonghong

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
做一个touchdown PCR就可以了
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生物化学与分子生物学
5楼2012-08-28 16:39:54
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