应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助】关于引物非特异性的问题
71/1返回列表
查看: 1577  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

nininini

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】关于引物非特异性的问题

我的引物25bp左右，目的产物100左右，以基因组为模板时扩增特异性很好，没发现非特异性，但后来以cDNA为模板却出现了50多的位置有一个明显的条带，目的条带也是有的，我的对照组没有加模板，只有引物，条带却是在100bp左右，那我的50bp左右的条带会是什么呢，请高手帮忙解释一下
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-04-06 18:50:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★
nininini(金币+1):谢谢参与
看看融解曲线的情况吧。最好把图放上来哦。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-04-06 19:13:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nininini

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 西瓜 at 2011-04-06 19:13:01:
看看融解曲线的情况吧。最好把图放上来哦。

是先用普通PCR 验证引物 P的，还没做real-time呢
赞一下 回复此楼
3楼2011-04-06 19:17:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

睡着数绵羊

银虫 (小有名气)
★
nininini(金币+1):谢谢参与
你是要做什么啊，如果是普通的P就不用基因组为模板啊，说的很模糊啊~~
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-04-06 20:01:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★
nininini(金币+1):谢谢参与
看天(金币+2): 鼓励交流 2011-04-06 22:36:45
楼主看是不是有这种可能：楼主设计的引物时跨了内含子，以基因组DNA为模版扩增时扩出来的100bp包含了内含子，而提取的RNA含有未除干净的DNA,反转录成cDNA时，扩增的条带中包含了两种条带，即以DNA为模版的扩增和以cDNA为模板的扩增。
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2011-04-06 21:59:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

65900931

银虫 (小有名气)
★
nininini(金币+1):谢谢参与
最好看看电泳图。
回复此楼
6楼2011-04-06 22:50:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nininini

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by blackrose8089 at 2011-04-06 21:59:23:
楼主看是不是有这种可能：楼主设计的引物时跨了内含子，以基因组DNA为模版扩增时扩出来的100bp包含了内含子，而提取的RNA含有未除干净的DNA,反转录成cDNA时，扩增的条带中包含了两种条带，即以DNA为模版的扩增和以 ...

我的是细菌的RNA，不存在内含子的问题~~还有什么解释方法吗~~谢谢啦~
赞一下 回复此楼
7楼2011-04-07 10:39:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 nininini 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭