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携手前

新虫 (初入文坛)

[求助] 各位大侠赐教,,酚氯仿提取的DNA,纯度很低,能不能进一步纯化下啊,如何除去酚杂质呢

提取的DNA纯度很低,260/280的值大概在0.9-1.0之间,吸收峰在270nm处(见上图),怕直接作为荧光定量RCR的模板影响实验结果,所以又加了一步氯仿抽提,乙醇沉淀,接着又测定DNA的含量和纯度,结果太诡异了,竟然没有吸收峰了,但是纯度提高了,DNA含量降低了,(见下图)

上图



下图
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wittyjc

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
弃乙醇上清的时候不小心倒掉了一些?
3楼2012-08-21 14:36:56
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查看全部 7 个回答

携手前

新虫 (初入文坛)

自定一下,免得沉了。各位踊跃回答哦,小女子不胜感激
2楼2012-08-21 11:43:34
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携手前

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wittyjc at 2012-08-21 14:36:56
弃乙醇上清的时候不小心倒掉了一些?

这个也有可能,但是怎么会没有一点峰呢?我怀疑DNA没有全部溶解,现在继续溶解试一下。。。。希望能有好结果
4楼2012-08-21 14:40:34
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王礼鹏

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
貌似DNA的OD260/280在1.6至1.8是比较纯的,比值太低了蛋白含量较多,不合适往下做RT-PCR,祝实验顺利。。。。。。
5楼2012-08-21 16:48:27
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