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携手前

新虫 (初入文坛)

[求助] 各位大侠赐教,,酚氯仿提取的DNA,纯度很低,能不能进一步纯化下啊,如何除去酚杂质呢

提取的DNA纯度很低,260/280的值大概在0.9-1.0之间,吸收峰在270nm处(见上图),怕直接作为荧光定量RCR的模板影响实验结果,所以又加了一步氯仿抽提,乙醇沉淀,接着又测定DNA的含量和纯度,结果太诡异了,竟然没有吸收峰了,但是纯度提高了,DNA含量降低了,(见下图)

上图



下图
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王礼鹏

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
貌似DNA的OD260/280在1.6至1.8是比较纯的,比值太低了蛋白含量较多,不合适往下做RT-PCR,祝实验顺利。。。。。。
5楼2012-08-21 16:48:27
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王礼鹏

金虫 (小有名气)

哦,不好意思,写错了,是OD值为1.7至1.9之间,最好是1.8左右
6楼2012-08-21 16:52:52
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