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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药代动力学 » LCMS对血浆样品分析：低浓度样品如何解决进样量和样品浓度的矛盾？
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zlfok00

新虫 (小有名气)

[求助] LCMS对血浆样品分析：低浓度样品如何解决进样量和样品浓度的矛盾？

血浆样品采用二氯甲烷萃取，吹干复溶浓缩，现在在做标准曲线，成分是生物碱，检测成分加内标一共7种。
前期摸索7种生物碱的色谱分离条件是采用高浓度（5mg/ml）低进样量（0.5ul），得到良好分离效果，此浓度下进样量提升到2ul以上便会出现过载现象。
现分析血浆样品，浓度梯度从2000ng/ml至1ng/ml，此时无论如何调整进样量，均得不到条件摸索时的分离效果。
本人刚接触药代方面，不知道做血浆成分分析的前辈们是怎么解决这个问题的？还望不吝赐教~ 谢谢！
结果如下图：标准曲线分析时，如果不进行EIC根本得不到良好结果，而EIC结果同样不理想。

标准曲线中终浓度tic结果



任一成分EIC结果，举例
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1楼 2012-08-16 17:11:40
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greatet

新虫 (小有名气)
你用的LLE 不知道回收率如何？换成SPE不知道会不会好一点。或者试一下用跟小体积的溶剂复溶。
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6楼2012-09-19 08:57:46
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zlfok00

新虫 (小有名气)
不好意思，tic那个图的标题是 标准曲线中中浓度tic结果~
呵呵
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2楼2012-08-16 17:13:05
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zlfok00

新虫 (小有名气)
为什么~~ 没人帮忙的么
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3楼2012-08-20 09:00:30
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mc0326

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
zlfok00: 金币+2, ★★★很有帮助, 不好意思！最近忙着找房子，实验都搁置了！ 2012-09-02 16:30:49
一种办法就是增大样品量，比如之前用100uL血浆，现在用200或300，然后挥干至较小体积，增加样品浓度。
另一种就是重新摸索梯度，看你的保留时间才1min，也太早了点。可以调一下流动相pH往碱性一些，保留时间会往后，分离度应该会好一些。只要你的柱子能耐受，可以用waters BEH，pH可以调到12。便宜一些的菲罗门应该也有很好的能耐碱性的柱子，你可以去查一下
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4楼2012-08-20 14:36:06
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