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雨帘静思铁杆木虫 (正式写手)
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[求助]
关于如何除去破碎的酵母细胞壁的问题？
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| 对于酵母细胞，产生子囊孢子后想破碎细胞壁得到其中的子囊孢子，现有困惑请教各位虫友，破碎后如何除去其中的杂质（细胞壁，细胞器等）得到比较纯净的子囊孢子?ps：做过相关实验离心不可以。 |
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hanxiaoyang0 
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【答案】应助回帖
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酶解法属于化学方法，物理方法应该是超声之类的，不需要使用化学或生物试剂的。 破碎技术中细胞破碎法包括 机械法和非机械法．机械法又包括高压匀浆、高速珠磨、超声波破碎等方法。非机械法包括化学法、酶解法、渗透压冲击法、冻结融化法、干燥法。细胞壁的结构和破碎方法都会对细胞破碎产生影响。了接细胞壁的组成对于选择破碎方法非常重要。在微生物中各种生物的细胞虽小但是每一种都有其特有的组成方式。例如：细菌球菌直径0.5-1um杆菌直径0.5-1um ，长为直径1-几倍螺旋菌直径03-1um，长1-50um 细菌大小也不是一成不变的细胞重量10-13-10-12g ，每g细菌基本结构是细胞不变部分，每个细胞都有，如细胞壁、膜、核。特殊结构是细胞可变部分，不是每个都有，如鞭毛、荚膜、芽孢。革兰氏阳性菌和阴性菌细胞壁的主要组成也是不同的，因而对细胞破碎的影响也不一样革兰氏阳性菌的细胞壁主要由肽聚糖层（约20－80nm）组成 ，而革兰氏阴性菌肽聚糖层较薄，仅2－3nm，在肽聚糖层外还有两层外壁层。外壁层约8－10nm，所以革兰氏阳性菌细胞壁较厚，较难破碎。对于霉菌来说 霉菌的细胞壁较厚，约100－250nm。酵母菌酵母的细胞壁比革兰氏阳性菌的细胞壁厚，更难破碎。 |
2楼2012-08-16 10:47:06