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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助，关于搭桥PCR
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sevenlalala

金虫 (小有名气)

[求助] 求助，关于搭桥PCR

最近在做一个3.5kb片段的扩增，一直扩不出来，就做了搭桥PCR，先是分成两个1.7kb片段，但是连不上，后来又换了中间的两条搭桥引物，变成2kb和1.5kb。无论是两个片段和引物一起PCR，还是先片段搭桥5个循环再加引物PCR都试过，还用了touchdown，但是只能得到一条不到1kb和一条大约1.6kb的片段，完全没有3+kb的痕迹，有哪位高人能指点一下么
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1楼 2012-08-09 15:40:49
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)
我也遇到了类似的问题，目前还没有找到解决办法
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3楼2012-08-10 10:56:54
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五行剑客

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
sevenlalala: 金币+5, ★有帮助, 再不行就只能这样试一下了，谢谢 2012-08-11 12:51:04
中间的两条搭桥引物，变成2.5kb和1kb 试一试
赞一下 回复此楼
天行健，君子以自强不息！
2楼2012-08-10 10:24:57
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sevenlalala

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by joan198108 at 2012-08-10 10:56:54
我也遇到了类似的问题，目前还没有找到解决办法

同是天涯苦命人啊，我现在还在尝试，多交流。
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4楼2012-08-11 12:52:09
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gaga123

木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by sevenlalala at 2012-08-11 12:52:09
同是天涯苦命人啊，我现在还在尝试，多交流。...

楼主，你的问题解决了吗？我现在也遇到了和你一样的问题，我的是需要搭桥PCR出3K左右的片段，现在两个片段大小都是1.5K左右。。。。希望多交流呀。。。谢谢你。
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5楼2012-12-19 10:37:34
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