24小时热门版块排行榜    

查看: 2790  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

不鸣鸟

木虫 (正式写手)

[求助] 大肠杆菌提质粒遇到问题,请高手帮忙

我用减法提质粒,大量提时各步骤观察没有异常,跑电泳结果如图1:
这是一次提的两管,第一个泳道在操作中失误了,就不说了,第二个泳道是怎么回事,挨着点样空的是蛋白没去干净吗?第二个亮带应该是质粒DNA吧,问题是最下边那个大亮带是怎么回事,是因为碱液裂解的过头把基因组DNA裂解成小片段了吗,这个是整个图片截取得一部分,有maker,最下那条带大小只有100~200bp左右,这是怎么回事,该怎么解决?

我后来又用减法小提,降低2号液碱液浓度跑的电泳图如图二


不知道该怎办,那位高手有提质粒的经验,能不能指点一下,提的时候有哪些是应该注意的,最关键的是怎样避免上面的问题

图一



图二
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tingspdf

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有质粒大量提取试剂盒,试试吧,多花点钱迈过去,没必要探讨这个
9楼2012-08-07 16:11:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

虫虫博士

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
自己配置的提取液吧,为什么不买试剂盒?不贵,得到的质粒很纯。
2楼2012-08-06 20:16:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

霹雳光

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是啊,用试剂盒提取的质粒很不错,挺便宜的
事实证明,除了你自己,不要指望任何一个人
3楼2012-08-06 20:28:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

不鸣鸟

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 虫虫博士 at 2012-08-06 20:16:05
自己配置的提取液吧,为什么不买试剂盒?不贵,得到的质粒很纯。

恩,这样提,想量大点,也用试剂盒提了,确实也很省事,我还是想问问碱法大量提的时候这个问题该怎么解决
4楼2012-08-06 20:38:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +22 yaoyewhu2008 2026-08-20 24/1200 2026-08-21 07:44 by DanielDDDD
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 基金啊基金 +3 longfie172 2026-08-20 3/150 2026-08-21 00:04 by wuchongjun
[基金申请] 科研孤儿太难了 +14 我4大白菜 2026-08-20 15/750 2026-08-20 22:33 by 袁向阳007
[基金申请] 让我中一个面上吧! +8 大萍1987 2026-08-20 10/500 2026-08-20 21:48 by 大萍1987
[基金申请] 言之凿凿,明天官网会通知放榜? +15 医学老男孩 2026-08-20 17/850 2026-08-20 20:35 by CaoLG
[基金申请] 时间戳又变了 +12 wuchongjun 2026-08-20 17/850 2026-08-20 20:05 by spzhao
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +14 kkkl_v 2026-08-19 15/750 2026-08-20 08:21 by sunzitan
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +4 yuleib84 2026-08-19 5/250 2026-08-19 19:52 by hhs666
[基金申请] 今天放榜吗? +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 什么时候开奖? +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
信息提示
请填处理意见