24小时热门版块排行榜    

查看: 3270  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

czcpudai

铜虫 (正式写手)

[求助] 内参引物和目的基因的引物可以放在同一个PCR管中反应吗?? 已有1人参与

本人想做rt-pcr,当做pcr这一步的时候,是否可以将actin基因和我的目的基因的引物放在同一个pcr管中反应呢???请各位指教!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

czcpudai

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by robert-RBT at 2012-08-05 01:49:05
最好别放在同一个管子里,结合效率不同,存在竞争性,可能导致结果不准确。RT-PCR以及real time PCR都要求条件控制严格,尽量一致才有可比性。

恩,多谢指教!往后就尽量先不把他们放在一起了!
3楼2012-08-05 13:47:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

robert-RBT

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-08-05 22:06:36
最好别放在同一个管子里,结合效率不同,存在竞争性,可能导致结果不准确。RT-PCR以及real time PCR都要求条件控制严格,尽量一致才有可比性。
2楼2012-08-05 01:49:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

czcpudai

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by robert-RBT at 2012-08-05 01:49:05
最好别放在同一个管子里,结合效率不同,存在竞争性,可能导致结果不准确。RT-PCR以及real time PCR都要求条件控制严格,尽量一致才有可比性。

您好,我还想问一个问题,我分了模型组,给药组,正常组,结果模型组的rna条带,不是太亮,正常组的rna条带很亮,给药组rna亮度介于两者之间,结果我也没有去测紫外定量,就取了3ul的模板做RT,然后做PCR的时候模板的量是2ul,结果最后跑电泳的时候没有条带,就有个别的几条带可以看见,我想问一下是不是我的RNA的量太少了,结果导致cDNA的量太少,做PCR的时候扩增效率不高所致呢?谢谢!
4楼2012-08-05 14:07:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

robert-RBT

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by czcpudai at 2012-08-05 14:07:33
您好,我还想问一个问题,我分了模型组,给药组,正常组,结果模型组的rna条带,不是太亮,正常组的rna条带很亮,给药组rna亮度介于两者之间,结果我也没有去测紫外定量,就取了3ul的模板做RT,然后做PCR的时候模板 ...

是所有的3个样品PCR都没有条带吗,还是只有模型组没有?如果只是模型组没有,可能是量太少。可以用内标基因检测,循环数降低,如果内标差别不大,就可能是PCR效率不高所致。
5楼2012-08-05 19:27:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +6 koalala 2026-08-24 6/300 2026-08-24 08:21 by 正能量1斤
[基金申请] 什么时候开奖? +10 CrisMessi 2026-08-18 11/550 2026-08-24 06:50 by 开心的小狮子
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +11 kulium 2026-08-21 14/700 2026-08-24 02:12 by 流流伤
[基金申请] 让我中一个面上吧! +12 大萍1987 2026-08-20 15/750 2026-08-23 20:44 by 大萍1987
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 14/700 2026-08-21 23:51 by cratir
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 科研孤儿太难了 +17 我4大白菜 2026-08-20 18/900 2026-08-21 20:57 by zhangev
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见