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小石头2007

金虫 (正式写手)

[交流] 有做过荧光定量PCR的吗? 已有7人参与

我要准备做荧光定量PCR,目的基因长度136bp,用普通PCR扩增,目的条带单一,没有非特异性扩增,但是引物二聚体比较多。这样的引物用来做荧光定量效果会好吗?
再有,提取的RNA质量对于后期荧光定量PCR有影响吗?我提的RNA的OD260/280比值在1.8-2.0之间,但是OD260/230的比值一直偏小,大概在1左右。这样的RNA能用来反转录,并作荧光定量PCR吗?

[ Last edited by 小石头2007 on 2012-8-23 at 20:44 ]
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zhudongyang

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
看天: 金币+2, 鼓励交流 常来 2012-08-19 08:27:27
用SYBR做real time pcr   引物至关重要,建议多设计几对引物,再进行筛选
6楼2012-08-18 22:09:28
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