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荧光定量pcr
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最近做了一次荧光定量pcr，遇到一些问题，请求高人指点： 做普通pcr用takara的mightyamp酶能扩增出较好的条带，所以做荧光定量pcr也用含有该酶的试剂，结果做出来的结果很不理想。空白Ct值24左右，拷贝数低于10的4次方都跟空白差不多。说明书也讲该酶不太适合做标准曲线，建议标曲用Ex Taq 酶，但是我之前做普通pcr试过Ex taq酶，电泳检测没有条带，所以非常担心换用含有Ex Taq酶的试剂做定量做不出来。由于做定量成本较高，虽有此怀疑又不敢轻易尝试，求高人指点迷津。 荧光定量结果电泳检测如下图：  标准品，从左到右依次10倍稀释（第三个空没有样品）  左边三个是阴性对照，右边三个是不加引物只加模板的空白对照 |
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