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NightのWish

金虫 (小有名气)

[求助] 求大神帮忙分析下SDS-PAGE胶结果

这是我跑的一个PAGE胶图,不知道为什么泳道里的背景色洗不掉。是杂蛋白含量太高了吗?
还是怎么回事?大家帮忙分析下,谢谢了!
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i thought i could fly,so why did i drown
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jl860822

金虫 (正式写手)


【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
NightのWish: 金币+1, 有帮助 2012-07-20 13:10:04
上样量太大了,直接减半试试
4楼2012-07-20 08:39:54
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gelois

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
NightのWish: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-07-20 13:10:24
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-07-20 13:42:05
你跑的胶很拖,MARKER没有问题,就说明是你的样品的原因。
有可能是你上样量太大,介意再用Buffer稀释样品,或者直接减少上样量。
上样前介意加热5-10min后,离心,再去上清上样。
5楼2012-07-20 08:41:58
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NightのWish

金虫 (小有名气)

引用回帖:
13楼: Originally posted by chunqizzm at 2012-07-24 07:40:12
希望LZ提供以下后续报道,我想知道到底是什么原因造成的。先谢谢了!

我上样前离了下心,感觉好多了。
i thought i could fly,so why did i drown
14楼2012-07-24 08:02:36
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普通回帖

chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1,点样前可高速离心。
2,请减少上样量。染色后可以脱色(或者用清水浸泡几个小时)后再照相。
2楼2012-07-20 08:17:12
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soholj

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
NightのWish: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-07-20 13:09:49
NightのWish: 金币+2 2012-07-20 13:14:39
可能上样中有沉淀,上样前离心下,上样不要吸到沉淀
也可能蛋白量太大,上样量少一点
3楼2012-07-20 08:23:06
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windsor2011

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
NightのWish: 金币+2 2012-07-20 13:11:08
一个原因是样品没混匀,另外上样的蛋白浓度太高,样品稀释数倍后再上样,也许结果会好点,祝好运
只要功夫深铁杵磨成针
6楼2012-07-20 08:44:37
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m6y6y6

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
电参数有点大 或者 缓冲液放少了 使得你的条带跳舞一样的  ,
7楼2012-07-20 14:38:44
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reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
首要的是要减少上样量吧。另外上样前离心一下可能有好处。
8楼2012-07-20 16:58:01
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ankang0910

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
上的蛋白样品太浓了,应该稀释一下。另外电压可能有些大,或是电流不稳定,建议一直用80伏跑。
实验顺利!!
9楼2012-07-20 19:56:30
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张立峰

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
建议离心后,取上清;另外蛋白样品太浓了,应该稀释一下。建议开始用80伏跑,压成一条线后再用160V跑
10楼2012-07-21 14:31:54
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