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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求大神帮忙分析下SDS-PAGE胶结果
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NightのWish

金虫 (小有名气)

[求助] 求大神帮忙分析下SDS-PAGE胶结果

这是我跑的一个PAGE胶图，不知道为什么泳道里的背景色洗不掉。是杂蛋白含量太高了吗？
还是怎么回事？大家帮忙分析下，谢谢了！
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i thought i could fly,so why did i drown
1楼 2012-07-19 22:01:00
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

jl860822

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
NightのWish: 金币+1, ★有帮助 2012-07-20 13:10:04
上样量太大了，直接减半试试
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4楼2012-07-20 08:39:54
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gelois

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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NightのWish: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-07-20 13:10:24
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-07-20 13:42:05
你跑的胶很拖，MARKER没有问题，就说明是你的样品的原因。
有可能是你上样量太大，介意再用Buffer稀释样品，或者直接减少上样量。
上样前介意加热5-10min后，离心，再去上清上样。
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5楼2012-07-20 08:41:58
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NightのWish

金虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by chunqizzm at 2012-07-24 07:40:12
希望LZ提供以下后续报道，我想知道到底是什么原因造成的。先谢谢了！

我上样前离了下心，感觉好多了。
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i thought i could fly,so why did i drown
14楼2012-07-24 08:02:36
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普通回帖

chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

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1，点样前可高速离心。
2，请减少上样量。染色后可以脱色（或者用清水浸泡几个小时）后再照相。
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2楼2012-07-20 08:17:12
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soholj

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
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NightのWish: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-07-20 13:09:49
NightのWish: 金币+2 2012-07-20 13:14:39
可能上样中有沉淀，上样前离心下，上样不要吸到沉淀
也可能蛋白量太大，上样量少一点
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3楼2012-07-20 08:23:06
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windsor2011

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
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NightのWish: 金币+2 2012-07-20 13:11:08
一个原因是样品没混匀，另外上样的蛋白浓度太高，样品稀释数倍后再上样，也许结果会好点，祝好运
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只要功夫深铁杵磨成针
6楼2012-07-20 08:44:37
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m6y6y6

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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电参数有点大 或者 缓冲液放少了 使得你的条带跳舞一样的  ，
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7楼2012-07-20 14:38:44
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reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
首要的是要减少上样量吧。另外上样前离心一下可能有好处。
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8楼2012-07-20 16:58:01
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ankang0910

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
上的蛋白样品太浓了，应该稀释一下。另外电压可能有些大，或是电流不稳定，建议一直用80伏跑。
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实验顺利！！
9楼2012-07-20 19:56:30
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张立峰

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
建议离心后，取上清；另外蛋白样品太浓了，应该稀释一下。建议开始用80伏跑，压成一条线后再用160V跑
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10楼2012-07-21 14:31:54
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