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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 荧光定量PCR用10ul反应成吗？
汕头大学海洋科学接受调剂
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zhang8826857

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 荧光定量PCR用10ul反应成吗？

荧光定量PCR有人用过10ul反应吗？会不会太少了呀，我担心蒸发干了，有人用过10ul反应吗？多谢了。手机没法悬赏金币，电脑上的时候追加悬赏金币。


另外，这是我今天刚做的10ul体系的结果，不行啊，不知道是体系的问题还是试剂的问题呀我的cDNA和酶都只冻融过一次，在4℃融化之后用的，在冰上配制的混合液，在冰上加的样。大侠帮忙分析是哪儿的原因啊！


[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]

[ Last edited by zhang8826857 on 2012-7-19 at 15:20 ]
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1楼 2012-07-17 23:36:04
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hxsm

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-07-19 15:21:31
zhang8826857: 金币+5, 谢谢 2012-09-21 16:24:54
曾经大规模数据都是用10的，没有一点问题，但是有时候也要看仪器和你的耗材，我整个流程几乎都是进口耗材，包括RNA的很多都是进口耗材，速度很快，这样的我5的体系也用过，其实没有什么问题的。。。移液枪，我是采用了一套全新的移液枪，用于整个实验流程。。。
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14楼2012-07-19 08:56:03
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
zhang8826857: 金币+5, 谢谢 2012-09-21 16:25:02
做过15的，10的没做过，感觉太少了吧，会不会加样误差大啊
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3楼2012-07-18 17:03:36
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
zhang8826857: 金币+2, 谢谢 2012-09-21 16:25:13
没问题，我以前做过。要用把好一点的移液枪，保证加样准确。
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4楼2012-07-18 17:28:47
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Rick001

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
zhang8826857: 金币+2, 谢谢 2012-09-21 16:25:19
太少了应该会影响复孔之间的差距以及重现性。
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5楼2012-07-18 18:33:12
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