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guyue900905

新虫 (初入文坛)

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[求助] 提取RNA后跑电泳，条带非常不清晰怎么回事啊？我是新手，谢谢啦！

我刚刚开始提取RNA，采用研钵提取的方法，提出的RNA测OD值，280/260还好在1.9~2.1之间，但是260/230特别的小，在1之下，操作中手套，口罩都有带，实在不知道是什么原因？想知道解决的方法。
同时，我提取完就跑了电泳，但是28s条带、18s条带基本没有，5s条带很清楚，不知道怎么会降解的这么严重。跑电泳时，120伏，6分钟。
谢谢啦！

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1楼 2012-07-16 22:39:58

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xjtu0025

新虫 (小有名气)

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专业: 基因组学

260/230很小，如果你是用trizol法提的，很简单你最后洗75%乙醇的时候多洗几遍，最后晾干的时候多晾一下。基本上洗4遍才能把值升到1以上，不会影响后期酶反应。
提RNA就三个窍门吧，低温，无酶，快。
我之前提也是新手，后来就算旁边有人跟我聊天。基本也没有什么降解的风险，数值也不错。注意所有接触到RNA的东西，你都要用DEPC水处理过。小强头建议你用新的盒装除酶的。。