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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 霉菌固体发酵产物提取方法
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haotea430

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1楼2012-07-13 21:27:35
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jiyannangxj

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美女搞科研

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发酵完毕后，直接捣碎琼脂，用等体积乙酸乙酯乙酸乙酯来萃取三次，提取目标产物。能告诉我你做的是哪株真菌吗？具体的名字，能不能共享菌株啊，我做的是植物病原微生物和海洋微生物，可以互换菌株，共同共享怎么样啊……

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2楼2012-07-13 22:46:16
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haotea430

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3楼2012-07-14 15:23:25
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jiyannangxj

至尊木虫 (著名写手)

美女搞科研

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rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-07-15 09:47:37
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3楼: Originally posted by haotea430 at 2012-07-14 15:23:25
可以的啊，我的是黑茶里的优势真菌，全名叫冠突散囊菌，因形态颜色金黄，因此又叫金花菌。

您说的用乙酸乙酯萃取的话，那琼脂应该不会溶于乙酸乙酯吧，萃取完后直接过滤除去琼脂是么？还有想请教下琼脂都会溶哪 ...

琼脂不会溶于乙酸乙酯的，萃取完成后，过滤即可，再说，琼脂会沉底的，很好除去，另外，乙酸乙酯的萃取范围很大，应该会萃到你的目标产物，如果你不放心，乙酸乙酯萃取完后，再用正丁醇或者甲醇萃取，这样的萃取物属于大极性的，乙酸乙酯相是中小极性的……

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4楼2012-07-14 19:07:49
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haotea430

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5楼2012-07-14 21:20:48
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haotea430

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6楼2012-07-14 21:21:28
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jiyannangxj

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★ ★
rainwander: 金币+2, 鼓励交流 2012-07-15 09:47:48
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6楼: Originally posted by haotea430 at 2012-07-14 21:21:28
怎样确定代谢产物是在菌体之内和之外？...

这个问题问的很好哦，第一，捣碎之前你要是不嫌麻烦，刮菌苔也可以，无非是分两份萃取，一份纯菌苔萃取，一份琼脂萃取，个人感觉还是直接萃取吧，我都是这么做的，第二，你的目标产物在菌体内还是外，这个不好说，你必须得做发酵液活性实验，首先少量发酵2L发酵液，过滤或者离心，分离菌体与发酵液，分别用乙酸乙酯萃取，菌体要用丙酮浸泡24h破细胞壁，然后旋干丙酮，得到的水相用乙酸乙酯萃取，分别得到了两种浸膏，取少量浸膏用水溶解，分别测活性，来确定活性目标产物的位置。你能给我寄些你那的菌株吗？多寄几种，我们给你寄海洋真菌好不好啊！共享啊……

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7楼2012-07-14 23:14:12
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jiyannangxj

至尊木虫 (著名写手)

美女搞科研

【答案】应助回帖

我又看了一遍你的帖子，必须有一点提醒你，我的方法是研究小分子化合物的，对蛋白质或者长肽链不适合，因为提取中用的有机溶剂会让蛋白质失活，短的多肽还是可以的，所以你首先得对目标产物有一定的了解。至少得知道大致的类型。

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8楼2012-07-14 23:19:00
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haotea430

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9楼2012-07-15 11:52:29
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liurechen

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【答案】应助回帖

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目标产物是茯茶素之类的么？先搞清楚易溶于水还是有机溶剂，易溶于有机溶剂比较好办，如果易溶于水就比较麻烦一点。试试干燥粉碎后提取，另外丙酮浸泡的话效果应该还是可以的，基本不用考虑破壁问题。
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相争两蜗角，所得一牛毛。 且灭嗔中火，休磨笑里刀。
10楼2012-07-15 15:25:33
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