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haotea430

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jiyannangxj

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发酵完毕后,直接捣碎琼脂,用等体积乙酸乙酯乙酸乙酯来萃取三次,提取目标产物。能告诉我你做的是哪株真菌吗?具体的名字,能不能共享菌株啊,我做的是植物病原微生物和海洋微生物,可以互换菌株,共同共享怎么样啊……

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2楼2012-07-13 22:46:16
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haotea430

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3楼2012-07-14 15:23:25
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jiyannangxj

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rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-07-15 09:47:37
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3楼: Originally posted by haotea430 at 2012-07-14 15:23:25
可以的啊,我的是黑茶里的优势真菌,全名叫冠突散囊菌,因形态颜色金黄,因此又叫金花菌。

您说的用乙酸乙酯萃取的话,那琼脂应该不会溶于乙酸乙酯吧,萃取完后直接过滤除去琼脂是么?还有想请教下琼脂都会溶哪 ...

琼脂不会溶于乙酸乙酯的,萃取完成后,过滤即可,再说,琼脂会沉底的,很好除去,另外,乙酸乙酯的萃取范围很大,应该会萃到你的目标产物,如果你不放心,乙酸乙酯萃取完后,再用正丁醇或者甲醇萃取,这样的萃取物属于大极性的,乙酸乙酯相是中小极性的……

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4楼2012-07-14 19:07:49
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haotea430

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5楼2012-07-14 21:20:48
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haotea430

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6楼2012-07-14 21:21:28
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jiyannangxj

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rainwander: 金币+2, 鼓励交流 2012-07-15 09:47:48
引用回帖:
6楼: Originally posted by haotea430 at 2012-07-14 21:21:28
怎样确定代谢产物是在菌体之内和之外?...

这个问题问的很好哦,第一,捣碎之前你要是不嫌麻烦,刮菌苔也可以,无非是分两份萃取,一份纯菌苔萃取,一份琼脂萃取,个人感觉还是直接萃取吧,我都是这么做的,第二,你的目标产物在菌体内还是外,这个不好说,你必须得做发酵液活性实验,首先少量发酵2L发酵液,过滤或者离心,分离菌体与发酵液,分别用乙酸乙酯萃取,菌体要用丙酮浸泡24h破细胞壁,然后旋干丙酮,得到的水相用乙酸乙酯萃取,分别得到了两种浸膏,取少量浸膏用水溶解,分别测活性,来确定活性目标产物的位置。你能给我寄些你那的菌株吗?多寄几种,我们给你寄海洋真菌好不好啊!共享啊……

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7楼2012-07-14 23:14:12
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jiyannangxj

至尊木虫 (著名写手)

美女搞科研

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我又看了一遍你的帖子,必须有一点提醒你,我的方法是研究小分子化合物的,对蛋白质或者长肽链不适合,因为提取中用的有机溶剂会让蛋白质失活,短的多肽还是可以的,所以你首先得对目标产物有一定的了解。至少得知道大致的类型。

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8楼2012-07-14 23:19:00
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haotea430

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9楼2012-07-15 11:52:29
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liurechen

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目标产物是茯茶素之类的么?先搞清楚易溶于水还是有机溶剂,易溶于有机溶剂比较好办,如果易溶于水就比较麻烦一点。试试干燥粉碎后提取,另外丙酮浸泡的话效果应该还是可以的,基本不用考虑破壁问题。
相争两蜗角,所得一牛毛。 且灭嗔中火,休磨笑里刀。
10楼2012-07-15 15:25:33
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