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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 微生物发酵加入底物后没有产物为什么？
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mgrll

新虫 (初入文坛)

[求助] 微生物发酵加入底物后没有产物为什么？

微生物发酵加入底物后没有产物为什么？
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1楼2012-11-26 14:53:07
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请叫我喵星人

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是微生物死掉了啊，否则不太可能出现这种情况的。你的实验过程中微生物有没有接触紫外灯？如果只是没有你想要的产物的话可能是发酵的量不够
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2楼2012-11-26 16:48:16
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weigh1111

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个原因多了去了……
首先看看菌对不对，别是污染了~
也有可能是产物浓度低，需要把发酵液浓缩一下
还有可能加的时间点不对~
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3楼2012-11-26 17:29:09
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lvbolantao

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不知道你的菌，我们的是在一定ph下才有产物的
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活在当下
4楼2012-11-26 20:15:45
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czdaeq

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励参与应助 2012-11-27 10:56:52
楼主，大概可以从一下多方面反思自己的实验：
1、确认菌体活性：看OD变化；取发酵中样（尽量无菌）涂布看看生长情况是否如期望。
2、确认菌体：确认基因型、所表达的载体；确认无混菌、染菌现象（这个可以既用梯度稀释涂布法，观察菌落形态；也可以镜检）。
3、以上都无误时，还可以从载体是否表达（诱导成功否）；产物的检测是否正确；发酵条件是否得当（初始底物浓度偏高or低？PH是否合适产品的获得；是否缺少某种添加物）；接种量是否应该加大（将100ml的种子，8000rpm离心，洗一遍，用5ml吹打起来，接入罐子等等做法）
4、祝实验顺利，bb拿来~~
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5楼2012-11-26 20:37:09
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kingleo99

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不知楼主发酵什么产什么产物，我曾经做过氨基酸发酵，也是有同样的问题，经常性的不产，确认一下你的菌株是否退化，另外，你的菌株前期是否经过活化，以及发酵时间是否够，培养基的碳氮比等合适。如果能补充稍稍具体点或许能帮助你
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科学就是发现规律，而规律是上帝创造的，认识独一上帝就是智慧。
6楼2012-11-26 22:06:22
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lanmayifly

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个问题的确可能很多，我来学习下，具体参考楼上的O(∩_∩)O~

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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7楼2012-11-27 00:49:31
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yfzhang2008

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助 2012-11-27 10:57:21
原因很多
1、是不是染杂菌了，杂菌生命力旺盛，你的菌种会衰退致死亡，所以没有产物。
2、无菌正常，如果是自然界筛选的菌种，一般是培养基不合适，或底物不对、或量不对、发酵PH不对、或加的时间不对，这种情况一般会或多或少有点产物，倒霉时可能真一点就没有。总之这种情况要在发酵工艺调控上下大工夫。
3、工程菌：如果是胞内，可能是诱导剂量或时机不对、离子浓度不对、发酵PH不对，或碳氮源比例不对等。这种情况一般会或多或少有点产物，倒霉时可能真一点就没有。
4、工程菌：如果是胞外蛋白产物，这种情况得不到产物的可能很大。不管是大肠杆菌还是酵母，只要代谢途径发生大的偏移，导致胞内的酶分泌到胞外，或代谢异常，产生能够破坏产物的酶，就一点也得不到产物蛋白。
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佛祖对每个人都是公平的
8楼2012-11-27 10:11:54
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小多余

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
底物浓度太高，阻遏产物代谢途径进行。
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9楼2012-11-27 13:20:04
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