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微生物发酵加入底物后没有产物为什么？
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2楼2012-11-26 16:48:16
weigh1111
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lvbolantao
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czdaeq
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【答案】应助回帖
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楼主，大概可以从一下多方面反思自己的实验： 1、确认菌体活性：看OD变化；取发酵中样（尽量无菌）涂布看看生长情况是否如期望。 2、确认菌体：确认基因型、所表达的载体；确认无混菌、染菌现象（这个可以既用梯度稀释涂布法，观察菌落形态；也可以镜检）。 3、以上都无误时，还可以从载体是否表达（诱导成功否）；产物的检测是否正确；发酵条件是否得当（初始底物浓度偏高or低？PH是否合适产品的获得；是否缺少某种添加物）；接种量是否应该加大（将100ml的种子，8000rpm离心，洗一遍，用5ml吹打起来，接入罐子等等做法） 4、祝实验顺利，bb拿来~~  |
5楼2012-11-26 20:37:09
kingleo99
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lanmayifly
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7楼2012-11-27 00:49:31
yfzhang2008
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【答案】应助回帖
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laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助 2012-11-27 10:57:21
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原因很多 1、是不是染杂菌了，杂菌生命力旺盛，你的菌种会衰退致死亡，所以没有产物。 2、无菌正常，如果是自然界筛选的菌种，一般是培养基不合适，或底物不对、或量不对、发酵PH不对、或加的时间不对，这种情况一般会或多或少有点产物，倒霉时可能真一点就没有。总之这种情况要在发酵工艺调控上下大工夫。 3、工程菌：如果是胞内，可能是诱导剂量或时机不对、离子浓度不对、发酵PH不对，或碳氮源比例不对等。这种情况一般会或多或少有点产物，倒霉时可能真一点就没有。 4、工程菌：如果是胞外蛋白产物，这种情况得不到产物的可能很大。不管是大肠杆菌还是酵母，只要代谢途径发生大的偏移，导致胞内的酶分泌到胞外，或代谢异常，产生能够破坏产物的酶，就一点也得不到产物蛋白。 |
8楼2012-11-27 10:11:54
9楼2012-11-27 13:20:04