24小时热门版块排行榜    

查看: 2004  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

934026718

新虫 (初入文坛)

[求助] 最奇怪的 Tricine SDS PAGE 怎么会成这样子?样品完全看不出 marker还行

Tricine-SDS-Page凝胶电泳储存液的配制如下:
Anode Buffer  (5x):        1 M Tris-Cl   pH = 8.9
Cathode Buffer(5x):         0.5M Tris, 0.5M Tricine Buffer     0.5% SDS, Ph8.25
Gel Buffer    (3x):        3M Tris-Cl, 0.3% SDS, pH=8.45
Glycerol :                  50%
GelSolution(49.5%T,6%C): 46.5g acrlamide,3,N’-Methylene bisacrylamide   add water to 100 ml   
loading buffer:150µl1mol/L pH6.8的Tris-HCl,300ul 甘油,0.12gSDS,0.0005g考马斯亮蓝G250,550ul水

Tricine-SDS-Page凝胶电泳浓缩胶及分离胶的配制如下:
Separating Gel (16.5%)
Gel solution: 3 ml
Gel Buffer  : 3 ml
50% Glycerol: 3 ml
10% AP      : 100 ul
TEMED       : 10 ul


Stacking Gel  ( 4% )
Gel solution: 0.5 ml
Gel Buffer  : 2.1 ml
Water       : 3.6 ml
10% AP      : 70 ul
TEMED        : 8 ul


我的电泳跑了好几次都是这样 完全不知道为什么 溶液都是新配的 应该不存在过期和PH不准确等问题 marker右边四个是样品
问题:1 marker为什么会有波浪不稳?
      2 样品怎么会和开了花似的?

希望各位大神解救我啊!!





[ Last edited by 934026718 on 2012-7-12 at 15:31 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jl860822

金虫 (正式写手)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你的Marker跑的比蛋白样品好一点,可能是你的样品中Loading的含量低,建议多加点Loading;然后胶跑成这个样子可能是胶没凝好,或者你的胶板是密封不太紧,有点漏胶,导致电压分布不均匀
9楼2012-07-15 12:18:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

lingpiao

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+1, 鼓励发帖交流问题。 2012-07-12 21:53:43
PAGE胶的问题,建议你重新配母液,一定注意pH的准确;另外上样孔一定要整齐
2楼2012-07-12 16:27:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

934026718

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lingpiao at 2012-07-12 16:27:48
PAGE胶的问题,建议你重新配母液,一定注意pH的准确;另外上样孔一定要整齐

我是配的49.5%T,6%c的浓度,用的23.25g丙烯酰胺+1.5g甲叉,定容50ml,这样有什么问题吗?
3楼2012-07-13 08:40:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lingpiao

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

多半要把pH调整一下,我以前跑普通SDSPAGE也出过这样的图,后来发现就是pH的问题
4楼2012-07-13 09:02:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 271材料工程求调剂 +6 .6lL 2026-03-18 6/300 2026-03-19 15:41 by haoshis
[考研] 085601材料工程专硕求调剂 +10 慕寒mio 2026-03-16 10/500 2026-03-19 15:26 by 丁丁*
[考研] 0817 化学工程 299分求调剂 有科研经历 有二区文章 +12 rare12345 2026-03-18 12/600 2026-03-19 14:41 by peike
[考研] 085600材料与化工调剂 324分 +10 llllkkkhh 2026-03-18 12/600 2026-03-19 14:33 by llllkkkhh
[考研] 求调剂 +3 Mqqqqqq 2026-03-19 3/150 2026-03-19 14:11 by peike
[考研] 求调剂,一志愿:南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕,总分289分 +3 @taotao 2026-03-19 3/150 2026-03-19 14:07 by peike
[考研] 287求调剂 +3 晨昏线与星海 2026-03-19 4/200 2026-03-19 12:32 by peike
[考研] 一志愿吉林大学材料学硕321求调剂 +6 Ymlll 2026-03-18 9/450 2026-03-19 10:28 by 星空星月
[考研] 本科郑州大学物理学院,一志愿华科070200学硕,346求调剂 +4 我不是一根葱 2026-03-18 4/200 2026-03-19 09:11 by 浮云166
[考研] 311求调剂 +4 冬十三 2026-03-18 4/200 2026-03-18 21:47 by 尽舜尧1
[考研] 354求调剂 +4 Tyoumou 2026-03-18 7/350 2026-03-18 21:45 by Tyoumou
[考研] 材料与化工一志愿南昌大学327求调剂推荐 +8 Ncdx123456 2026-03-13 9/450 2026-03-18 14:40 by haxia
[考研] 288求调剂,一志愿华南理工大学071005 +4 ioodiiij 2026-03-17 4/200 2026-03-18 12:36 by Linda Hu
[考研] 0854,计算机类招收调剂 +3 胡辣汤放糖 2026-03-15 6/300 2026-03-18 12:09 by 上岸上岸……..
[考博] 环境领域全国重点实验室招收博士1-2名 +3 QGZDSYS 2026-03-13 5/250 2026-03-18 11:13 by QGZDSYS
[考研] [导师推荐]西南科技大学国防/材料导师推荐 +3 尖角小荷 2026-03-16 6/300 2026-03-16 23:21 by 尖角小荷
[考研] 药学383 求调剂 +3 药学chy 2026-03-15 4/200 2026-03-16 20:51 by 元子^0^
[考研] 070303 总分349求调剂 +3 LJY9966 2026-03-15 5/250 2026-03-16 14:24 by xwxstudy
[考研] 297求调剂 +4 学海漂泊 2026-03-13 4/200 2026-03-14 11:51 by 热情沙漠
[考研] 295求调剂 +3 小匕仔汁 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:17 by vgtyfty
信息提示
请填处理意见