24小时热门版块排行榜    

查看: 1966  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

934026718

新虫 (初入文坛)

[求助] 最奇怪的 Tricine SDS PAGE 怎么会成这样子?样品完全看不出 marker还行

Tricine-SDS-Page凝胶电泳储存液的配制如下:
Anode Buffer  (5x):        1 M Tris-Cl   pH = 8.9
Cathode Buffer(5x):         0.5M Tris, 0.5M Tricine Buffer     0.5% SDS, Ph8.25
Gel Buffer    (3x):        3M Tris-Cl, 0.3% SDS, pH=8.45
Glycerol :                  50%
GelSolution(49.5%T,6%C): 46.5g acrlamide,3,N’-Methylene bisacrylamide   add water to 100 ml   
loading buffer:150µl1mol/L pH6.8的Tris-HCl,300ul 甘油,0.12gSDS,0.0005g考马斯亮蓝G250,550ul水

Tricine-SDS-Page凝胶电泳浓缩胶及分离胶的配制如下:
Separating Gel (16.5%)
Gel solution: 3 ml
Gel Buffer  : 3 ml
50% Glycerol: 3 ml
10% AP      : 100 ul
TEMED       : 10 ul


Stacking Gel  ( 4% )
Gel solution: 0.5 ml
Gel Buffer  : 2.1 ml
Water       : 3.6 ml
10% AP      : 70 ul
TEMED        : 8 ul


我的电泳跑了好几次都是这样 完全不知道为什么 溶液都是新配的 应该不存在过期和PH不准确等问题 marker右边四个是样品
问题:1 marker为什么会有波浪不稳?
      2 样品怎么会和开了花似的?

希望各位大神解救我啊!!





[ Last edited by 934026718 on 2012-7-12 at 15:31 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

934026718

新虫 (初入文坛)

今天把所有缓冲液的PH全部调整了一遍 还是不行啊
6楼2012-07-13 17:58:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

lingpiao

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+1, 鼓励发帖交流问题。 2012-07-12 21:53:43
PAGE胶的问题,建议你重新配母液,一定注意pH的准确;另外上样孔一定要整齐
2楼2012-07-12 16:27:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

934026718

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lingpiao at 2012-07-12 16:27:48
PAGE胶的问题,建议你重新配母液,一定注意pH的准确;另外上样孔一定要整齐

我是配的49.5%T,6%c的浓度,用的23.25g丙烯酰胺+1.5g甲叉,定容50ml,这样有什么问题吗?
3楼2012-07-13 08:40:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lingpiao

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

多半要把pH调整一下,我以前跑普通SDSPAGE也出过这样的图,后来发现就是pH的问题
4楼2012-07-13 09:02:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 i3cz6qj6l2 2026-02-17 3/150 2026-02-18 11:09 by lqtl9djx19
[考博] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 i3cz6qj6l2 2026-02-17 3/150 2026-02-18 10:54 by lqtl9djx19
[考研] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 i3cz6qj6l2 2026-02-17 3/150 2026-02-18 10:39 by lqtl9djx19
[考研] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-18 08:53 by lqtl9djx19
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-18 08:38 by lqtl9djx19
[找工作] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-17 4/200 2026-02-18 07:55 by lotyj5cz79
[基金申请] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:40 by lotyj5cz79
[考研] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:38 by lotyj5cz79
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:23 by lotyj5cz79
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:08 by lotyj5cz79
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-16 3/150 2026-02-18 06:53 by lotyj5cz79
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-18 00:40 by tk2gfblvuz
[找工作] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 4/200 2026-02-18 00:23 by tk2gfblvuz
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-17 23:40 by tk2gfblvuz
[基金申请] 基金正文30页指的是报告正文还是整个申请书 +3 successhe 2026-02-16 4/200 2026-02-17 20:56 by successhe
[基金申请] 今年春晚有几个节目很不错,点赞! +5 瞬息宇宙 2026-02-16 6/300 2026-02-17 12:49 by jymy19840415
[微米和纳米] 球磨粉体时遇到了大的问题,请指教! 10+3 6sbiam 2026-02-12 15/750 2026-02-16 15:03 by tgzxzqj
[基金申请] 过年走亲戚时感受到了所开私家车的鄙视链 +3 瞬息宇宙 2026-02-15 5/250 2026-02-16 14:23 by aspect3000
[基金申请] 情人节自我反思:在爱情中有过遗憾吗? +4 瞬息宇宙 2026-02-15 5/250 2026-02-15 22:28 by baiboxie
[硕博家园] 江汉大学解明教授课题组招博士研究生/博士后 +3 cleverlyy 2026-02-12 3/150 2026-02-12 21:02 by qsdf1
信息提示
请填处理意见