24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 2060  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

934026718

新虫 (初入文坛)

[求助] 最奇怪的 Tricine SDS PAGE 怎么会成这样子?样品完全看不出 marker还行

Tricine-SDS-Page凝胶电泳储存液的配制如下:
Anode Buffer  (5x):        1 M Tris-Cl   pH = 8.9
Cathode Buffer(5x):         0.5M Tris, 0.5M Tricine Buffer     0.5% SDS, Ph8.25
Gel Buffer    (3x):        3M Tris-Cl, 0.3% SDS, pH=8.45
Glycerol :                  50%
GelSolution(49.5%T,6%C): 46.5g acrlamide,3,N’-Methylene bisacrylamide   add water to 100 ml   
loading buffer:150µl1mol/L pH6.8的Tris-HCl,300ul 甘油,0.12gSDS,0.0005g考马斯亮蓝G250,550ul水

Tricine-SDS-Page凝胶电泳浓缩胶及分离胶的配制如下:
Separating Gel (16.5%)
Gel solution: 3 ml
Gel Buffer  : 3 ml
50% Glycerol: 3 ml
10% AP      : 100 ul
TEMED       : 10 ul


Stacking Gel  ( 4% )
Gel solution: 0.5 ml
Gel Buffer  : 2.1 ml
Water       : 3.6 ml
10% AP      : 70 ul
TEMED        : 8 ul


我的电泳跑了好几次都是这样 完全不知道为什么 溶液都是新配的 应该不存在过期和PH不准确等问题 marker右边四个是样品
问题:1 marker为什么会有波浪不稳?
      2 样品怎么会和开了花似的?

希望各位大神解救我啊!!





[ Last edited by 934026718 on 2012-7-12 at 15:31 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陈年芬芳

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
Marker貌似也不行,只是勉强看得清。这种情况其实也常见。多是缓冲液pH的问题,母液重新配一下吧。
5楼2012-07-13 09:08:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

lingpiao

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+1, 鼓励发帖交流问题。 2012-07-12 21:53:43
PAGE胶的问题,建议你重新配母液,一定注意pH的准确;另外上样孔一定要整齐
2楼2012-07-12 16:27:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

934026718

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lingpiao at 2012-07-12 16:27:48
PAGE胶的问题,建议你重新配母液,一定注意pH的准确;另外上样孔一定要整齐

我是配的49.5%T,6%c的浓度,用的23.25g丙烯酰胺+1.5g甲叉,定容50ml,这样有什么问题吗?
3楼2012-07-13 08:40:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lingpiao

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

多半要把pH调整一下,我以前跑普通SDSPAGE也出过这样的图,后来发现就是pH的问题
4楼2012-07-13 09:02:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 297,工科调剂? +11 河南农业大学-能 2026-04-14 11/550 2026-04-19 20:07 by Equinoxhua
[考博] 申博自荐 +4 Linxia林夏 2026-04-13 4/200 2026-04-19 19:55 by Equinoxhua
[考研] 求调剂 +10 小聂爱学习 2026-04-16 12/600 2026-04-19 16:51 by 中豫男
[论文投稿] 有没有接收比较快的sci期刊呀,最好在一个月之内的,研三孩子求毕业 20+4 之护着 2026-04-16 6/300 2026-04-19 13:00 by Aaron_zyn
[考研] 0854求调剂 +23 门路摸摸 2026-04-15 27/1350 2026-04-19 01:59 by 烟雨流涯
[考研] 一志愿沪9,326求生物学调剂 +12 刘墨墨 2026-04-13 12/600 2026-04-18 23:31 by 路病情
[考研] 320求调剂 +5 深郊akm 2026-04-17 5/250 2026-04-18 19:52 by 王珺璞
[考研] 297,工科调剂? +5 河南农业大学-能 2026-04-14 5/250 2026-04-18 15:17 by Equinoxhua
[考研] 收到复试调剂但是去不了 +8 小蜗牛* 2026-04-16 8/400 2026-04-18 11:15 by zixin2025
[考研] 急需调剂 +9 绝不放弃22 2026-04-15 10/500 2026-04-18 08:09 by chixmc
[考研] 化工学硕294分,求导师收留 +33 yzyzx 2026-04-12 37/1850 2026-04-17 23:00 by wunaiy88
[考研] 一志愿沪9,生物学326求调剂 +9 刘墨墨 2026-04-15 9/450 2026-04-16 17:14 by 崔崔崔cccc
[考研] 297,工科调剂?河南农业大学本科 +14 河南农业大学-能 2026-04-14 14/700 2026-04-16 14:41 by dingyanbo1
[基金申请] RY:中国产出的科学垃圾论文,绝对数量和比例都世界第一 +7 zju2000 2026-04-14 18/900 2026-04-16 11:36 by 欢乐颂叶蓁
[考研] 求调剂学校 +14 不会吃肉 2026-04-13 16/800 2026-04-15 21:59 by noqvsozv
[考研] 297工科调剂? +14 河南农业大学-能 2026-04-13 15/750 2026-04-15 13:25 by 黑科技矿业
[教师之家] 转长聘了 +7 简单化xn 2026-04-13 7/350 2026-04-14 14:50 by xindong
[考研] 求调剂 +12 何气正 2026-04-13 13/650 2026-04-14 14:47 by zs92450
[考研] 085600材料与化工329分求调剂 +24 叶zilin 2026-04-13 25/1250 2026-04-14 09:20 by 试管破裂
[考研] 考研英一数一338分 +9 长江大学东校区 2026-04-13 10/500 2026-04-14 00:41 by 王珺璞
信息提示
请填处理意见