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20104226034银虫 (小有名气)
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[求助]
CYP3A5大肠杆菌表达 没有目的蛋白？
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各位高手能否给予指教！ 表达载体：PCW 宿主细菌：DH5α 细菌培养过夜后1:100转移至含有100ug/ml的氨苄抗性的LB培养基中，37度培养3h至OD600为0.6，加入IPTG终浓度为1mM , 25度培养20h，结果发现没有目的蛋白，不知是什么原因？文献中报道要在培养体系中加(0.5 mM 5-aminolevulinic acid, trace salts, and 1 mM thiamine），不知这些东西是否一定要加，各有什么作用呢？ |
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