24小时热门版块排行榜

返回列表

caiyifan

金虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 888
散金: 234
红花: 3
帖子: 160
在线: 210.1小时
虫号: 524117
注册: 2008-03-13
性别: GG
专业: 计算机软件

[求助] 各位兄弟姐妹们，请教下各位AFLP的相关问题，不甚感激

我想问的问题有以下几点：
1. AFLP的读带有什么规律？比如，是读哪个区间的呢？50bp-500bp, 100bp-700bp?有没有什么参考的标准？或者说有没有什么依据呢？

2. AFLP为什么要变性？这样岂不是让条带更多更杂吗？

3. 选择性扩增结束后，PCR产物加变性剂94℃变性5min，为什么PAGE胶里还要加尿素，是让DNA始终保持单链的状态吗？

4. 我在跑Marker的时候，发现Marker也有杂带，无法清楚的指示位置，我的Marker是没变性的，但有的老师说Marker也要变性，可是Marker变性的话岂不是就不能和说明书上对照统一啦？

暂时就想到以上4个问题，希望各位大牛不吝赐教啊！

回复此楼

I can and I will

1楼 2012-07-10 12:42:05

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

caiyifan

金虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 888
散金: 234
红花: 3
帖子: 160
在线: 210.1小时
虫号: 524117
注册: 2008-03-13
性别: GG
专业: 计算机软件

都没人回复的？自己顶一下~

赞一下

回复此楼

I can and I will

2楼2012-07-18 13:53:06

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

虫儿7893

银虫 (小有名气)

应助: 6 (幼儿园)
金币: 512.7
散金: 75
红花: 1
帖子: 291
在线: 87小时
虫号: 651766
注册: 2008-11-11
性别: MM

关注学习，顶一下

回复此楼

3楼2012-08-02 14:16:54

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

chenguestc

木虫 (职业作家)

MolEPI: 7
应助: 576 (博士)
贵宾: 0.4
金币: 4526.9
散金: 1639
红花: 176
帖子: 4708
在线: 353.5小时
虫号: 1337860
注册: 2011-07-05
性别: GG
专业: 作物分子育种

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-08-02 15:44:35

1，看你设计引物时目标片段的大小。
2，变性后消除高级结果的影响使结果更加准确，这是为什么在点样前要先将样品和MARKER变性的原因。
3，尿素是变性剂，你的理解是对的，保持单链状态。预电泳也是这个目的，使胶中的单晶跑出去，再有就是使胶一直在37-43度左右避免电泳过程中DNA复性。
4，MARKER是必须变性的，否则无法确定你的目标片段大小，否则，样品变性，MARKER不变性，没有可比性。

赞一下

回复此楼

4楼2012-08-02 15:00:45

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖