应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR失败求高手指点！！！！！！！！！
41/1返回列表
查看: 784  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

lpsyz007

新虫 (小有名气)

[求助] PCR失败求高手指点！！！！！！！！！

PCR DNA模板是埃芥 用的正反引物是ARA10-1F和ARA10-1R但是没有成功 是不是引物和模板不契合，还有就是我们离心DNA模板让他从酒精分离没有任何沉淀，可能是模板的问题？希望高手解答下！！！！THX
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-07-05 12:50:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
lpsyz007: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-07-07 10:17:35
首先弱弱的问下楼主正反引物ARA10-1F和ARA10-1R是啥？
第二个离心DNA模板让他从酒精分离，有时候肉眼是看不到DNA沉淀的，这个我提基因组的时候也遇到过，不过没关系，里面有DNA的，可能量比较少，最后用TE或者水定容体系小一点.
赞一下 回复此楼
Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
2楼2012-07-05 14:39:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanghd2826

铁虫 (小有名气)
★ ★ ★
amisking: 金币+3, 鼓励发帖交流问题。 2012-07-05 20:23:23
从lz给的信息中基本没法推断是什么原因。
一般PCR无外乎就是引物、模板和条件，这三个因素相互排除下即可。模板可以用内参检测。引物的话如果是用别人的或者是通用引物，一般问题不大。条件可能是最麻烦的，一般先做个梯度看下，能不能出带，如果能出带，那么说明引物和模板都ok，后面只是优化了。
一次PCR失败很正常，尤其是照搬别人的条件时，适当调整下，可能会有惊喜。
希望能对lz有所帮助。
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2012-07-05 16:21:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lpsyz007

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wanghd2826 at 2012-07-05 16:21:19
从lz给的信息中基本没法推断是什么原因。
一般PCR无外乎就是引物、模板和条件，这三个因素相互排除下即可。模板可以用内参检测。引物的话如果是用别人的或者是通用引物，一般问题不大。条件可能是最麻烦的，一般先 ...

谢谢提醒
回复此楼
4楼2012-07-07 10:18:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lpsyz007 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 i3cz6qj6l2 2026-02-17 3/150 2026-02-18 11:09 by lqtl9djx19
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 i3cz6qj6l2 2026-02-17 3/150 2026-02-18 10:54 by lqtl9djx19
[考研] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 i3cz6qj6l2 2026-02-17 3/150 2026-02-18 10:39 by lqtl9djx19
[考研] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-18 08:53 by lqtl9djx19
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-18 08:38 by lqtl9djx19
[找工作] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-17 4/200 2026-02-18 07:55 by lotyj5cz79
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:40 by lotyj5cz79
[考研] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:38 by lotyj5cz79
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:23 by lotyj5cz79
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:08 by lotyj5cz79
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-16 3/150 2026-02-18 06:53 by lotyj5cz79
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-18 00:40 by tk2gfblvuz
[找工作] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 4/200 2026-02-18 00:23 by tk2gfblvuz
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-17 23:40 by tk2gfblvuz
[基金申请] 基金正文30页指的是报告正文还是整个申请书 +3 successhe 2026-02-16 4/200 2026-02-17 20:56 by successhe
[基金申请] 今年春晚有几个节目很不错，点赞！ +5 瞬息宇宙 2026-02-16 6/300 2026-02-17 12:49 by jymy19840415
[微米和纳米] 球磨粉体时遇到了大的问题，请指教！ 10+3 6sbiam 2026-02-12 15/750 2026-02-16 15:03 by tgzxzqj
[基金申请] 过年走亲戚时感受到了所开私家车的鄙视链 +3 瞬息宇宙 2026-02-15 5/250 2026-02-16 14:23 by aspect3000
[基金申请] 情人节自我反思：在爱情中有过遗憾吗？ +4 瞬息宇宙 2026-02-15 5/250 2026-02-15 22:28 by baiboxie
[硕博家园] 江汉大学解明教授课题组招博士研究生/博士后 +3 cleverlyy 2026-02-12 3/150 2026-02-12 21:02 by qsdf1
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭