| 查看: 443 | 回复: 2 | ||||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | ||||
war3one金虫 (著名写手)
|
[求助]
构建质粒的问题
|
|||
|
我现在有个整合载体，有一个质粒，我想把整合载体里边的一个基因替换成质粒里边的营养缺陷性基因，请问试验如何设计？ 谢谢各位的帮助了 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 【分子生物】EPI帖 | 核酸与基因生物学 |
» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有236人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 质粒构建疑难杂症
已经有22人回复
- 质粒构建
已经有13人回复
- 细胞稳定转染，质粒的设计
已经有15人回复
- 关于农杆菌单菌株/双质粒表达载体的构建问题
已经有14人回复
- 构建好的质粒如何防止丢失
已经有12人回复
- 关于质粒的构建
已经有17人回复
- 转质粒不成功,好几次了,大家给分析一下问题会出在哪里
已经有11人回复
- 求助啊！转质粒出现问题了！
已经有13人回复
- 重组质粒构建疑难问题
已经有3人回复
- 【求助/交流】构建质粒问题
已经有8人回复
- 【求助/交流】大肠杆菌转化质粒，出来的不是我要的了，怎么回事？
已经有13人回复
- 【求助/交流】请教质粒构建问题
已经有9人回复
- 【求助/交流】关于质粒构建与表达的问题
已经有14人回复
tianyinghu
金虫 (小有名气)
- MolEPI: 1
- 应助: 23 (小学生)
- 金币: 527.5
- 红花: 1
- 帖子: 52
- 在线: 43.9小时
- 虫号: 502164
- 注册: 2008-02-14
- 专业: 生物大分子结构与功能
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, MolEPI+1, 鼓励积极解决问题 2012-07-04 13:53:01
war3one: 金币+15, ★★★★★最佳答案, 谢谢，但是请问下如何突变成2个酶切位点呢？ 2012-07-05 10:24:16
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, MolEPI+1, 鼓励积极解决问题 2012-07-04 13:53:01
war3one: 金币+15, ★★★★★最佳答案, 谢谢，但是请问下如何突变成2个酶切位点呢？ 2012-07-05 10:24:16
|
方法很多： 介绍一种比较方便的方法吧，我目前就把你这2个基因编个号吧： 整合载体里边的一个基因：A,营养缺陷性基因:B 估计A基因2端没有酶切位点才犯愁的，如果有酶切位点的话那就简单多了，直接把B基因PCR酶切连接就好了，那怕这酶切位点不是直接跟在A的都好办的，只有把多余的序列设计到引物上就好了，当然比较头疼的是A的2端没有酶切位点。遇到这种情况也分2种比较常用的方法，如果你手里有Infusion酶的话，那就好办多了，设计2对引物，直接把整合载体P出来，接头设计20个只有的B基因，同样的B基因的引物加整合载体接头序列，如果你没有这个酶的话，你可以设计2个酶切位点，把这个A基因给突变掉，突变成2个酶切位点就可以了，然后正常的PCR酶切连接。 |
2楼2012-07-04 12:26:08
tianyinghu
金虫 (小有名气)
- MolEPI: 1
- 应助: 23 (小学生)
- 金币: 527.5
- 红花: 1
- 帖子: 52
- 在线: 43.9小时
- 虫号: 502164
- 注册: 2008-02-14
- 专业: 生物大分子结构与功能
3楼2012-07-09 10:09:54
