应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » pMAL载体表达重组蛋白
51/1返回列表
查看: 2595  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

758836596

铜虫 (初入文坛)

[求助] pMAL载体表达重组蛋白

最近在做蛋白表达，载体选择的是pMAL，目的片段是自己设计的一段300多bp的片段，质粒构建成功之后蛋白就是表达不出来，宿主菌试了TB1和BL21，诱导温度试了37,30,16，IPTG也试了各种浓度，结果还是诱导不出来，请问有什么别的办法啊？谢谢各位了。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-07-02 21:14:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

plumplumgxc

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
应该是构建载体时用的序列的问题，pMal应该不难做的。回头检查一下是不是有低级错误
赞一下 回复此楼
科研这条道不好走啊。。。
9楼2012-07-04 10:57:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 虫虫最近很活跃哦，谢谢对分子版的支持 2012-07-03 15:36:20
gyesang: 回帖置顶 2013-05-29 19:02:17
表达不出来的原因很多的，宿主菌跟诱导条件是一方面，另一方面要考虑你扩增的目的片段是否完整？有无表达先例，这个可以参照一些文献，还有你目标片段的稀有密码子是否检测过，如果连续出现稀有密码子，可能会造成翻译中断，这也会造成蛋白表达的失败，如果是这个情况就需要更换专门表达稀有密码子过多的宿主细胞.
建议楼主多从表达载体和目的片段的结构入手，祝楼主好运.
赞一下 回复此楼
Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
2楼2012-07-02 21:48:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bayo

禁虫 (初入文坛)
小丹木木: 屏蔽内容, 广告屏蔽 2012-07-03 15:36:51
本帖内容被屏蔽
4楼2012-07-03 11:49:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

758836596

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 阿娇阿娇 at 2012-07-03 10:46:02
顶

5楼2012-07-03 13:29:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭