24小时热门版块排行榜    

查看: 2420  |  回复: 14
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

758836596

铜虫 (初入文坛)

[求助] pMAL载体表达重组蛋白

最近在做蛋白表达,载体选择的是pMAL,目的片段是自己设计的一段300多bp的片段,质粒构建成功之后蛋白就是表达不出来,宿主菌试了TB1和BL21,诱导温度试了37,30,16,IPTG也试了各种浓度,结果还是诱导不出来,请问有什么别的办法啊?谢谢各位了。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

758836596

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by Marado at 2012-07-03 13:43:54
连续的AT或者GC
宿主细胞可以选择Rosetta系列的菌株...

谢谢啦,实在不行我就试试吧。
8楼2012-07-03 17:24:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 虫虫最近很活跃哦,谢谢对分子版的支持 2012-07-03 15:36:20
gyesang: 回帖置顶 2013-05-29 19:02:17
表达不出来的原因很多的,宿主菌跟诱导条件是一方面,另一方面要考虑你扩增的目的片段是否完整?有无表达先例,这个可以参照一些文献,还有你目标片段的稀有密码子是否检测过,如果连续出现稀有密码子,可能会造成翻译中断,这也会造成蛋白表达的失败,如果是这个情况就需要更换专门表达稀有密码子过多的宿主细胞.
建议楼主多从表达载体和目的片段的结构入手,祝楼主好运.
Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
2楼2012-07-02 21:48:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bayo

禁虫 (初入文坛)

小丹木木: 屏蔽内容, 广告屏蔽 2012-07-03 15:36:51
本帖内容被屏蔽

4楼2012-07-03 11:49:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

758836596

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 阿娇阿娇 at 2012-07-03 10:46:02

5楼2012-07-03 13:29:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿武理材料工程348求调剂 +3  ̄^ ̄゜汗 2026-03-19 5/250 2026-03-22 14:03 by  ̄^ ̄゜汗
[考研] 一志愿华中科技大学071000,求调剂 +4 沿岸有贝壳6 2026-03-21 4/200 2026-03-22 07:21 by ilovexiaobin
[考研] 【考研调剂】化学专业 281分,一志愿四川大学,诚心求调剂 +11 吃吃吃才有意义 2026-03-19 11/550 2026-03-21 18:23 by 学员8dgXkO
[考研] 278求调剂 +9 烟火先于春 2026-03-17 9/450 2026-03-21 17:47 by 学员8dgXkO
[考研] 297求调剂 +11 戏精丹丹丹 2026-03-17 12/600 2026-03-21 17:47 by ColorlessPI
[考研] 材料 271求调剂 +5 展信悦_ 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:29 by 学员8dgXkO
[考研] 298求调剂 +4 上岸6666@ 2026-03-20 4/200 2026-03-21 17:14 by 学员8dgXkO
[考研] 材料与化工(0856)304求 B区 调剂 +3 邱gl 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:47 by lature00
[考研] 初始318分求调剂(有工作经验) +3 1911236844 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:33 by JourneyLucky
[考研] 材料专硕英一数二306 +7 z1z2z3879 2026-03-18 7/350 2026-03-20 23:48 by JourneyLucky
[考研] 321求调剂 +9 何润采123 2026-03-18 11/550 2026-03-20 23:19 by JourneyLucky
[考研] 295材料求调剂,一志愿武汉理工085601专硕 +5 Charlieyq 2026-03-19 5/250 2026-03-20 20:35 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕 +5 @taotao 2026-03-20 5/250 2026-03-20 20:16 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 @taotao 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:35 by JourneyLucky
[考研] 0856调剂,是学校就去 +8 sllhht 2026-03-19 9/450 2026-03-20 14:25 by 无懈可击111
[考研] 考研求调剂 +3 橘颂. 2026-03-17 4/200 2026-03-17 21:43 by 有只狸奴
[考研] 085601求调剂 +4 Du.11 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:08 by ruiyingmiao
[考博] 26申博 +4 八6八68 2026-03-16 4/200 2026-03-17 13:00 by 轻松不少随
[考研] 中科院材料273求调剂 +4 yzydy 2026-03-15 4/200 2026-03-16 15:59 by Gaodh_82
[考研] 070303 总分349求调剂 +3 LJY9966 2026-03-15 5/250 2026-03-16 14:24 by xwxstudy
信息提示
请填处理意见