| 查看: 1747 | 回复: 7 | ||
[求助]
阴离子交换柱穿透
|
| 我的目标蛋白 pI=6.3~6.5 使用缓冲溶液 5mM pH=7.5 Tris-HCl 通过阴离子交换柱，但是蛋白一点也没有吸附上，全都冲下来了，曾经使用过20mM pH=8.0 Tris-HCl 做缓冲溶液，还是吸附不住，柱子是新换上的，不知道是什么问题造成的 |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有187人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 用阴离子树脂交换柱分离一种杂质
已经有4人回复
- 蛋白酶分离纯化
已经有6人回复
- 关于Q Sepharose® Fast Flow 阴离子交换柱挂柱问题
已经有8人回复
- 用离子交换法纯化蛋白如何选定缓冲液？
已经有3人回复
- 出售伯乐的阴离子交换层析预装柱和GST标签纯化预装柱！
已经有26人回复
- 一种蛋白能先用阳离子交换层析再用阴离子交换层析吗
已经有6人回复
- 重金求助关于离子交换树脂层析柱分离中性多糖的操作，先行谢谢各位
已经有15人回复
- 强酸性离子交换柱怎么操作
已经有3人回复
- 蛋白纯化一个很挠头的问题，请高手指教！
已经有7人回复
- 【讨论】阴离子交换柱 多糖
已经有11人回复
- 【求助/交流】大家做蛋白纯化的都到什么型号柱子，效果怎么样呢
已经有10人回复
- 【求助/交流】又没人用过Q Sepharose® Fast Flow这种阴离子交换柱，请教一下洗脱
已经有11人回复
- 【求助/交流】离子交换层析
已经有10人回复
anyaxiong
铁杆木虫 (知名作家)
- 应助: 61 (初中生)
- 金币: 8751.8
- 散金: 2291
- 红花: 26
- 沙发: 63
- 帖子: 8730
- 在线: 743.1小时
- 虫号: 974100
- 注册: 2010-03-17
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+3, 鼓励发帖交流问题。 2012-06-30 21:58:27
cuipibird: 金币+20, ★★★★★最佳答案 2012-07-03 09:27:28
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+3, 鼓励发帖交流问题。 2012-06-30 21:58:27
cuipibird: 金币+20, ★★★★★最佳答案 2012-07-03 09:27:28
| 你的目标蛋白所处的溶液盐浓度是不是过高了，一般理论上电导大于5mS/cm的话，盐离子就会与目的蛋白竞争离子交换剂的带点基团，从而导致目的蛋白挂不上柱；还有一个可能的原因就是tris-HCl所使用的环境温度要稳定，它随环境温度的改变而改变，例如：4℃时缓冲液的pH＝8.4，则37℃时的pH＝7.4，所以一定要在使用温度下进行配制，室温下配制的Tris-HCl缓冲液不能用于0℃～4℃。 |
cuipibird
2楼2012-06-30 10:22:28
dshlove
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 17
- 应助: 237 (大学生)
- 金币: 4764.7
- 散金: 20
- 红花: 10
- 帖子: 852
- 在线: 419.2小时
- 虫号: 1609389
- 注册: 2012-02-10
- 性别: GG
- 专业: 污染控制化学
3楼2012-07-02 09:06:01
4楼2012-07-03 09:25:20
5楼2012-07-03 09:27:11
dshlove
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 17
- 应助: 237 (大学生)
- 金币: 4764.7
- 散金: 20
- 红花: 10
- 帖子: 852
- 在线: 419.2小时
- 虫号: 1609389
- 注册: 2012-02-10
- 性别: GG
- 专业: 污染控制化学
6楼2012-07-03 11:18:03
anyaxiong
铁杆木虫 (知名作家)
- 应助: 61 (初中生)
- 金币: 8751.8
- 散金: 2291
- 红花: 26
- 沙发: 63
- 帖子: 8730
- 在线: 743.1小时
- 虫号: 974100
- 注册: 2010-03-17
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
7楼2012-07-03 16:02:34
8楼2012-07-05 08:51:48
20