24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

yangcaoqing

新虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 91.3
帖子: 210
在线: 87.8小时
虫号: 458156

[交流] race实验载体测序获得的片段不是目的片段

初次做race实验，在测序方面遇到了好多问题，希望各位高手能帮我分析分析。
1 一个基因连载体后测序一般都送几个菌落呢？我送了两三个菌落，测序结果为什么不一样呢？备注：都可以找到GSP引物和AUAP引物。
2 测序后跟目的基因比对，前100bp可以比对上，后面几百的bp就比对不上了，这是为什么呢？
3 同一个基因，我已经换了三条GSP内层引物了，每次测序回来都不是我要的基因序列，有什么解决这种问题的办法呢？

谢谢各位啊！

回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

生物实验技术与方法

测序相关问题

» 猜你喜欢

为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种? 已经有5人回复
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》已经有3人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有265人回复
求助食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社电子版已经有5人回复
胶体几丁质的结晶度？已经有0人回复
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士已经有2人回复
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线已经有5人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:
查看全部散金贴

1楼2012-06-26 11:02:09

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

wcg129

禁虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+2, 股交流 2012-06-27 13:45:53
yangcaoqing: 金币+5, 终于有人回帖了谢谢啊 2012-06-27 15:52:33

本帖内容被屏蔽

3楼2012-06-27 13:13:15

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

查看全部 12 个回答

yangcaoqing

新虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 91.3
帖子: 210
在线: 87.8小时
虫号: 458156

木有人理我...

回复此楼

2楼2012-06-27 10:56:44

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

yangcaoqing

新虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 91.3
帖子: 210
在线: 87.8小时
虫号: 458156

引用回帖:

3楼: Originally posted by wcg129 at 2012-06-27 13:13:15
我送了两三个菌落，测序结果为什么不一样呢？备注：都可以找到GSP引物和AUAP引物。
这个可以再提高退火温度试试

还有你扩的基因是什么类型基因，如果是诱导型表达的最好诱导后增强其表达再提取RNA再做

内层扩增我做过梯度检测，每个梯度条带都很明亮而且单一；另外，不是诱导型表达的基因。菌落PCR检测时用的是GSP内层引物和AUAP，扩出来的条带和内层PCR扩增的条带一致。想请教下问题还有可能出在哪里呢？