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foxcl铁虫 (正式写手)
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做GS115感受态最后一步－80保藏，是否需要加甘油？
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按正常方法制做GS115酵母感觉态。 200mL最后加2mL的山梨醇，是否需要加50%甘油再－80度保藏？ 因为做Jm109感受态的时候，最后一步我是加50ul的CaCl2和50ul的甘油（总共100ul），然后－80保藏。所以有此一问。 谢谢。 |
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molecula
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【答案】应助回帖
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zhang8826857: 金币+2, 端午节快乐，欢迎来微生物板块交流^_^ 2012-06-23 16:41:12
foxcl: 金币+1, ★★★★★最佳答案, 想知道如果最后一步50ul的山梨醇+50ul的50%甘油，再冷冻是否可行？有什么影响？ 2012-06-23 16:53:07
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我的建议是 把做好的感受态的EP管放在大的50ml离心管中 在50ml离心管中装入甘油 然后放入-80 这样的方法好处有两个 第一 缓慢降温，更有利于感受态的效率 第二 最大效率防治冰晶产生 即便是超低温停电除了故障 外围的甘油也有一个缓慢升温的过程 这个是实验室小技巧 呵呵~  |
lvye37074楼2012-06-23 11:24:25
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青鸟7980
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3楼2012-06-23 10:09:09
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foxcl: 金币+1, 谢谢。我摇瓶200mL做一次要2.5个小时，每次新鲜做会疯掉的。 2012-06-24 09:44:14
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