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foxcl

铁虫 (正式写手)

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[求助] 做GS115感受态最后一步－80保藏，是否需要加甘油？

按正常方法制做GS115酵母感觉态。

200mL最后加2mL的山梨醇，是否需要加50%甘油再－80度保藏？

因为做Jm109感受态的时候，最后一步我是加50ul的CaCl2和50ul的甘油（总共100ul），然后－80保藏。所以有此一问。

谢谢。

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1楼2012-06-23 00:22:17

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molecula

铁杆木虫 (著名写手)

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【答案】应助回帖

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zhang8826857: 金币+2, 端午节快乐，欢迎来微生物板块交流^_^ 2012-06-23 16:41:12
foxcl: 金币+1, ★★★★★最佳答案, 想知道如果最后一步50ul的山梨醇+50ul的50%甘油，再冷冻是否可行？有什么影响？ 2012-06-23 16:53:07

我的建议是  把做好的感受态的EP管放在大的50ml离心管中
在50ml离心管中装入甘油
然后放入-80  这样的方法好处有两个
第一  缓慢降温，更有利于感受态的效率
第二  最大效率防治冰晶产生
即便是超低温停电除了故障
外围的甘油也有一个缓慢升温的过程
这个是实验室小技巧
呵呵~