24小时热门版块排行榜    

查看: 3377  |  回复: 12

foxcl

铁虫 (正式写手)

[求助] 做GS115感受态最后一步-80保藏,是否需要加甘油?

按正常方法制做GS115酵母感觉态。

200mL最后加2mL的山梨醇,是否需要加50%甘油再-80度保藏?

因为做Jm109感受态的时候,最后一步我是加50ul的CaCl2和50ul的甘油(总共100ul),然后-80保藏。所以有此一问。

谢谢。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

molecula

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+2, 端午节快乐,欢迎来微生物板块交流^_^ 2012-06-23 16:41:12
foxcl: 金币+1, ★★★★★最佳答案, 想知道如果最后一步50ul的山梨醇+50ul的50%甘油,再冷冻是否可行?有什么影响? 2012-06-23 16:53:07
我的建议是  把做好的感受态的EP管放在大的50ml离心管中
在50ml离心管中装入甘油
然后放入-80  这样的方法好处有两个
第一  缓慢降温,更有利于感受态的效率
第二  最大效率防治冰晶产生
即便是超低温停电除了故障
外围的甘油也有一个缓慢升温的过程
这个是实验室小技巧
呵呵~

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2012-06-23 11:24:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

灵响2010

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 端午节快乐,欢迎来微生物板块交流^_^ 2012-06-23 16:40:57
foxcl: 金币+1, 可是很多时候都是做大批量再冷冻的啊。 2012-06-23 16:51:18
毕赤酵母感受态细胞,是现做现用的
2楼2012-06-23 09:51:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

青鸟7980

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 端午节快乐,欢迎来微生物板块交流^_^ 2012-06-23 16:41:03
foxcl: 金币+1, ★★★★★最佳答案, 对山梨醇特性不熟,所以最后还是加了一半的甘油。 2012-06-23 16:51:58
不加甘油
里面不是加了山梨醇吗
就这样放负80度冰箱里
可以用至少2个月
3楼2012-06-23 10:09:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nemo88

禁虫 (小有名气)

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+1, 鼓励发帖交流问题。 2012-06-23 22:06:06
foxcl: 金币+1, 谢谢。我摇瓶200mL做一次要2.5个小时,每次新鲜做会疯掉的。 2012-06-24 09:44:14
本帖内容被屏蔽

5楼2012-06-23 21:02:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

foxcl

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by nemo88 at 2012-06-23 21:02:51
酵母我也是现做现用的 这个不是不建议冻存?
反正我是宁可花费上两天时间去制备新的,也不愿意用旧的没做出来等上一周没结果再回去找原因

那你是直接用试管小批量制作的吧?
不是用摇瓶摇的吧?

做完保存肯定可以,但是和新鲜做的效果差多少目前不太清楚。
6楼2012-06-24 09:43:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nemo88

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

7楼2012-06-24 15:24:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

毛桃就是我

银虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by molecula at 2012-06-23 11:24:25
我的建议是  把做好的感受态的EP管放在大的50ml离心管中
在50ml离心管中装入甘油
然后放入-80  这样的方法好处有两个
第一  缓慢降温,更有利于感受态的效率
第二  最大效率防治冰晶产生
即便是超低温停电除了 ...

这个方法好!
木有签名呀!
8楼2012-06-25 10:54:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihao1988903

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
最好感受态别放置太长时间,现做现用。
9楼2012-06-25 11:00:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jinpeng_6118

木虫 (正式写手)

LZ,请问GS115菌株(或者SMD1168)能交换或者寄点给我吗,最近用km71在做,表达效果不怎么样,所以想要点菌株,谢谢
人生百态原为海,看破红尘方为岸!
10楼2012-06-25 15:15:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 foxcl 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[教师之家] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 F4zcb7xRCEJA 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:51 by pMlf9MbdMHyc
[考研] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 yPv6ndDtiRxQ 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:09 by thgx1vqMqrLw
[博后之家] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 yPv6ndDtiRxQ 2026-08-10 7/350 2026-08-11 20:39 by thgx1vqMqrLw
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[教师之家] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 GpvwGNVshCOp 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:39 by thgx1vqMqrLw
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] filecode +9 documentary 2026-08-10 9/450 2026-08-11 10:08 by wk7465
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 13/650 2026-08-11 09:49 by 家与远方
[基金申请] 基金中了 +15 laoda193707 2026-08-06 15/750 2026-08-11 00:11 by jiafei2190
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +3 majunge000 2026-08-10 3/150 2026-08-10 15:46 by lch2012
[基金申请] 好奇怪的filecode +4 布布和一二 2026-08-08 5/250 2026-08-10 14:20 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
信息提示
请填处理意见