24小时热门版块排行榜    

查看: 2217  |  回复: 6

天马0825

银虫 (小有名气)

[求助] 毕赤酵母工程菌的保藏 已有1人参与

各位虫友,小女子刚开始做毕赤酵母重组菌的构建,筛选了一株表达量高的,而后用YPD斜面保藏,但是后来再做的时候,发现表达量急剧下降减少了约十倍,同样的培养方法。求解释。。。。我再怀疑是不是我的保藏有问题,应该拿MD斜面保藏么?还是什么?求大神指点?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

自信加努力成就人生
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lvye3707

金虫 (正式写手)

你好,我刚开始做酵母表达,没有做遗传霉素筛选,挑阳性Gs115菌种后,在YPD培养基里摇菌,需要加G418抗生素么?
2楼2013-11-18 08:53:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天马0825

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lvye3707 at 2013-11-18 08:53:01
你好,我刚开始做酵母表达,没有做遗传霉素筛选,挑阳性Gs115菌种后,在YPD培养基里摇菌,需要加G418抗生素么?

那得看你使用的什么载体和宿主吧。G418一般是用来筛选多拷贝的!
自信加努力成就人生
3楼2013-11-18 09:57:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lvye3707

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 天马0825 at 2013-11-18 09:57:18
那得看你使用的什么载体和宿主吧。G418一般是用来筛选多拷贝的!...

谢谢了
4楼2013-11-18 11:15:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

肖颖2009

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
YPD斜面保藏菌种是短期保存菌种的方法,顶多就个把月的时间,看斜面有变干的迹象就应该重新穿刺保存,或者是用YDP的培养基摇混后用甘油管保存,甘油管保存的时间可以相对长一些。你可以尝试着把斜面的酵母菌重新活化(也就是重新划线)后再接种摇瓶。
5楼2013-11-18 14:22:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天马0825

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 肖颖2009 at 2013-11-18 14:22:30
YPD斜面保藏菌种是短期保存菌种的方法,顶多就个把月的时间,看斜面有变干的迹象就应该重新穿刺保存,或者是用YDP的培养基摇混后用甘油管保存,甘油管保存的时间可以相对长一些。你可以尝试着把斜面的酵母菌重新活化 ...

谢谢!因为我的斜面也就只做了半个多月,进行的摇瓶。应该不至于退化吧,而且按理来讲酵母重组菌的稳定性能应该挺高的。我就一直很好奇,想想可能是染菌了,所以准备换用YNB培养!
自信加努力成就人生
6楼2013-11-18 18:22:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lymic07

禁虫 (初入文坛)

本帖内容被屏蔽

7楼2013-12-31 18:13:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 天马0825 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +4 a089 2026-08-26 5/250 2026-08-27 09:24 by Howard28
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 +7 晴天加油 2026-08-26 8/400 2026-08-27 07:53 by longfie172
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 LIbGuocjEEYw 2026-08-26 4/200 2026-08-27 02:01 by Ie9AyIAvGbvs
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +9 炎黄贵胄 2026-08-22 10/500 2026-08-26 15:40 by semaglutide
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +4 叶九微 2026-08-26 4/200 2026-08-26 10:52 by xiacongxu
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[基金申请] 人气不行了 +11 fansofjerry 2026-08-21 11/550 2026-08-25 11:04 by 孤独的英雄6
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
信息提示
请填处理意见