24小时热门版块排行榜    

查看: 2980  |  回复: 12

foxcl

铁虫 (正式写手)

[求助] 做GS115感受态最后一步-80保藏,是否需要加甘油?

按正常方法制做GS115酵母感觉态。

200mL最后加2mL的山梨醇,是否需要加50%甘油再-80度保藏?

因为做Jm109感受态的时候,最后一步我是加50ul的CaCl2和50ul的甘油(总共100ul),然后-80保藏。所以有此一问。

谢谢。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

molecula

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+2, 端午节快乐,欢迎来微生物板块交流^_^ 2012-06-23 16:41:12
foxcl: 金币+1, ★★★★★最佳答案, 想知道如果最后一步50ul的山梨醇+50ul的50%甘油,再冷冻是否可行?有什么影响? 2012-06-23 16:53:07
我的建议是  把做好的感受态的EP管放在大的50ml离心管中
在50ml离心管中装入甘油
然后放入-80  这样的方法好处有两个
第一  缓慢降温,更有利于感受态的效率
第二  最大效率防治冰晶产生
即便是超低温停电除了故障
外围的甘油也有一个缓慢升温的过程
这个是实验室小技巧
呵呵~

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2012-06-23 11:24:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

灵响2010

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 端午节快乐,欢迎来微生物板块交流^_^ 2012-06-23 16:40:57
foxcl: 金币+1, 可是很多时候都是做大批量再冷冻的啊。 2012-06-23 16:51:18
毕赤酵母感受态细胞,是现做现用的
2楼2012-06-23 09:51:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

青鸟7980

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 端午节快乐,欢迎来微生物板块交流^_^ 2012-06-23 16:41:03
foxcl: 金币+1, ★★★★★最佳答案, 对山梨醇特性不熟,所以最后还是加了一半的甘油。 2012-06-23 16:51:58
不加甘油
里面不是加了山梨醇吗
就这样放负80度冰箱里
可以用至少2个月
3楼2012-06-23 10:09:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nemo88

禁虫 (小有名气)

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+1, 鼓励发帖交流问题。 2012-06-23 22:06:06
foxcl: 金币+1, 谢谢。我摇瓶200mL做一次要2.5个小时,每次新鲜做会疯掉的。 2012-06-24 09:44:14
本帖内容被屏蔽

5楼2012-06-23 21:02:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

foxcl

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by nemo88 at 2012-06-23 21:02:51
酵母我也是现做现用的 这个不是不建议冻存?
反正我是宁可花费上两天时间去制备新的,也不愿意用旧的没做出来等上一周没结果再回去找原因

那你是直接用试管小批量制作的吧?
不是用摇瓶摇的吧?

做完保存肯定可以,但是和新鲜做的效果差多少目前不太清楚。
6楼2012-06-24 09:43:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nemo88

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

7楼2012-06-24 15:24:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

毛桃就是我

银虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by molecula at 2012-06-23 11:24:25
我的建议是  把做好的感受态的EP管放在大的50ml离心管中
在50ml离心管中装入甘油
然后放入-80  这样的方法好处有两个
第一  缓慢降温,更有利于感受态的效率
第二  最大效率防治冰晶产生
即便是超低温停电除了 ...

这个方法好!
木有签名呀!
8楼2012-06-25 10:54:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihao1988903

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
最好感受态别放置太长时间,现做现用。
9楼2012-06-25 11:00:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jinpeng_6118

木虫 (正式写手)

LZ,请问GS115菌株(或者SMD1168)能交换或者寄点给我吗,最近用km71在做,表达效果不怎么样,所以想要点菌株,谢谢
人生百态原为海,看破红尘方为岸!
10楼2012-06-25 15:15:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 foxcl 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 070300化学319求调剂 +7 锦鲤0909 2026-03-17 7/350 2026-03-21 03:46 by JourneyLucky
[考研] 083200学硕321分一志愿暨南大学求调剂 +3 innocenceF 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:35 by JourneyLucky
[考研] 278求调剂 +6 烟火先于春 2026-03-17 6/300 2026-03-21 01:57 by JourneyLucky
[考研] 279分求调剂 一志愿211 +11 chaojifeixia 2026-03-19 12/600 2026-03-21 01:49 by 星空星月
[考研] 311求调剂 +5 冬十三 2026-03-18 5/250 2026-03-21 00:16 by JourneyLucky
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +5 77chaselx 2026-03-20 5/250 2026-03-20 23:42 by lovewei0727
[考研] 一志愿南京理工大学085701资源与环境302分求调剂 +4 葵梓卫队 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:02 by JourneyLucky
[考研] 324求调剂 +5 lucky呀呀呀鸭 2026-03-20 5/250 2026-03-20 22:30 by 促天成
[考研] 261求B区调剂,科研经历丰富 +3 牛奶很忙 2026-03-20 4/200 2026-03-20 19:34 by JourneyLucky
[考研] 086500 325 求调剂 +3 领带小熊 2026-03-19 3/150 2026-03-20 18:38 by 尽舜尧1
[考博] 申博26年 +3 八6八68 2026-03-19 3/150 2026-03-19 19:43 by nxgogo
[考研] 286求调剂 +6 lemonzzn 2026-03-16 10/500 2026-03-19 14:31 by lemonzzn
[考研] 一志愿福大288有机化学,求调剂 +3 小木虫200408204 2026-03-18 3/150 2026-03-19 13:31 by houyaoxu
[考研] 0854可跨调剂,一作一项核心论文五项专利,省、国级证书40+数一英一287 +8 小李0854 2026-03-16 8/400 2026-03-18 14:35 by 搏击518
[考研] 301求调剂 +4 A_JiXing 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:32 by ruiyingmiao
[考研] 考研化学学硕调剂,一志愿985 +4 张vvvv 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:15 by ruiyingmiao
[考研] 一志愿南京大学,080500材料科学与工程,调剂 +4 Jy? 2026-03-16 4/200 2026-03-17 11:02 by gaoqiong
[考研] 11408 一志愿西电,277分求调剂 +3 zhouzhen654 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:03 by laoshidan
[考研] 333求调剂 +3 文思客 2026-03-16 7/350 2026-03-16 18:21 by 文思客
[考研] 中科院材料273求调剂 +4 yzydy 2026-03-15 4/200 2026-03-16 15:59 by Gaodh_82
信息提示
请填处理意见