应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 制感受态的氯化钙溶液
131/2返回列表12下一页
查看: 3076  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

Hliotrope

木虫 (著名写手)

[求助] 制感受态的氯化钙溶液 已有3人参与

制感受态的氯化钙溶液时间长了会有影响吗？最近做化转一直没转出来，怀疑是感受态的问题，用的氯化钙溶液是去年五月十三号师姐制的，不知道是不是氯化钙的问题。
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

蛋白表达相关

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
Someone
1楼 2014-02-24 09:22:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流经验！ 2014-02-24 18:30:27
我们实验室的CaCl2是过滤除菌的，你要不要试试这种方法？甘油可以高压灭菌后再加到配制的CaCl2溶液中。此外，制作感受态不成功的原因有很多，比如原始菌种的活性本来就不好
赞一下(1人) 回复此楼
植根于内心的修养；无需提醒的自觉；以约束为前提的自由；为别人着想的善良
5楼2014-02-24 16:29:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-02-24 10:43:18
氯化钙要放在4度保存。感受态不好应该不是它的原因。制备感受态需要一直冰上操作。你如果不放心，就重新制备，不会花很长时间，但记得制备的氯化钙和甘油都要灭菌以后放4度保存。
赞一下 回复此楼
2楼2014-02-24 10:00:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

123q明

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-02-24 10:00:20
氯化钙要放在4度保存。感受态不好应该不是它的原因。制备感受态需要一直冰上操作。你如果不放心，就重新制备，不会花很长时间，但记得制备的氯化钙和甘油都要灭菌以后放4度保存。

我想请教一下，关于感受态的问题，我一直都是按着步骤一步一步做的，但是感受态一直不行，上面不长菌，不知道什么原因，而且我用氯化钙洗的时候，都洗四遍，菌摇到光密度值为4.7，，前几天做的又失败了，请给予指点。。。
赞一下 回复此楼
3楼2014-02-24 13:25:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 123q明 at 2014-02-24 13:25:39
我想请教一下，关于感受态的问题，我一直都是按着步骤一步一步做的，但是感受态一直不行，上面不长菌，不知道什么原因，而且我用氯化钙洗的时候，都洗四遍，菌摇到光密度值为4.7，，前几天做的又失败了，请给予指点 ...

菌先要菌种活化，然后稍微扩大培养。再然后大量摇菌，这时要注意，摇菌到OD值为0.6-0.8，再进行离心收集菌体。
注意：培养基不能加抗生素的。
赞一下 回复此楼
4楼2014-02-24 15:35:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

123q明

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-02-24 15:35:57
菌先要菌种活化，然后稍微扩大培养。再然后大量摇菌，这时要注意，摇菌到OD值为0.6-0.8，再进行离心收集菌体。
注意：培养基不能加抗生素的。...

恩！我们做的OD值一般为0.4-0.6之间，侧重偏0.4左右，氯化钙我们也不灭菌的，难道是这的原因？明天又要开始做感受态了
赞一下 回复此楼
6楼2014-02-25 16:27:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 123q明 at 2014-02-25 16:27:00
恩！我们做的OD值一般为0.4-0.6之间，侧重偏0.4左右，氯化钙我们也不灭菌的，难道是这的原因？明天又要开始做感受态了...

我们的的灭了。
回复此楼
7楼2014-02-25 18:22:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

damaomao

禁虫 (正式写手)
★ ★ ★
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2014-03-30 17:07:43
本帖内容被屏蔽
8楼2014-02-26 23:10:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Hliotrope

木虫 (著名写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by damaomao at 2014-02-26 23:10:33
建议重配氯化钙并灭菌，但感觉没多大影响，应该仔细核对细胞是否适用于该方法制备感受态，其次注意质粒是否适用于该细胞并且抗性基因正确并完好（建议同时做另一种确定能转化并带有相同抗性的质粒做对照），再次实验 ...

thank you
回复此楼
Someone
9楼2014-02-27 09:53:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhoucd07net

铜虫 (小有名气)
你是不是甘油浓度不对？
以前也是这样，不长菌，后来发现是甘油浓度低所致，重配之后就OK了……
赞一下 回复此楼
10楼2014-02-27 15:50:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Hliotrope 的主题更新
131/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 电子信息279求调剂，有书读就行 +3 wwwooden 2026-04-08 5/250 2026-04-09 17:05 by 大三不四
[考研] 086003调剂求助 +15 苏弋万 2026-04-09 16/800 2026-04-09 16:19 by zhuimr
[考研] 262求调剂 +10 天下第一文 2026-04-04 13/650 2026-04-09 15:16 by 探123
[考研] 284求调剂 +4 让我上岸吧阿西 2026-04-09 4/200 2026-04-09 11:52 by 5268321
[考研] 求助071001调剂！！！ +7 黄守松 2026-04-05 8/400 2026-04-09 09:07 by 徐良白眉大侠
[考研] 一志愿985初试354分生物调剂 +3 031001 2026-04-06 3/150 2026-04-09 00:30 by Evan_Liu
[考研] 325分化学调剂 +9 15771691647 2026-04-02 9/450 2026-04-08 19:21 by ruoyu867
[考研] 307求调剂 +3 Youth@@ 2026-04-07 3/150 2026-04-07 22:00 by hemengdong
[考研] 一志愿西电085401求调剂 +4 sunw1306 2026-04-07 4/200 2026-04-07 16:40 by 啵啵啵0119
[考研] 材料调剂 +17 小刘同学吖吖 2026-04-06 18/900 2026-04-07 11:41 by 诗与自由
[考研] 专硕304找调剂，一线城市最好 +3 李lsl李 2026-04-05 3/150 2026-04-06 12:16 by ffffjjjj
[考研] 308求调剂 +3 终不似从前 2026-04-05 3/150 2026-04-05 20:07 by 啵啵啵0119
[考研] 工科277分求调剂材料 +8 上了上了上哦 2026-04-05 9/450 2026-04-05 13:05 by wwytracy
[考研] 数一英一274机械调剂 +5 星陨流霞 2026-04-04 6/300 2026-04-05 11:38 by arrow8852
[考研] 295求调剂 +4 A你好研究生 2026-04-04 5/250 2026-04-04 22:46 by yu221
[考研] 一志愿北京科技大学材料工程085601，求调剂 +17 cdyw 2026-04-02 18/900 2026-04-04 11:14 by w_xuqing
[考研] 268求调剂 +8 你好tg 2026-04-03 9/450 2026-04-04 05:08 by gswylq
[考研] 274求调剂 +9 顺理成张 2026-04-03 10/500 2026-04-03 15:10 by 啊俊！
[考研] 366求调剂 +7 sbdnd 2026-04-03 7/350 2026-04-03 12:40 by cymywx
[考研] 312求调剂 +4 赊月色 2026-04-02 5/250 2026-04-03 08:21 by fangshan711
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭