| 查看: 2996 | 回复: 12 | ||
foxcl铁虫 (正式写手)
|
[求助]
做GS115感受态最后一步－80保藏，是否需要加甘油？
|
|
|
按正常方法制做GS115酵母感觉态。 200mL最后加2mL的山梨醇，是否需要加50%甘油再－80度保藏？ 因为做Jm109感受态的时候，最后一步我是加50ul的CaCl2和50ul的甘油（总共100ul），然后－80保藏。所以有此一问。 谢谢。 |
回复此楼» 猜你喜欢
278求调剂
已经有9人回复
-
297求调剂
已经有12人回复
-
0703化学297求调剂
已经有3人回复
-
材料学硕301分求调剂
已经有6人回复
-
280求调剂
已经有11人回复
-
311求调剂
已经有3人回复
-
求调剂
已经有3人回复
-
313求调剂
已经有4人回复
-
317求调剂
已经有15人回复
-
307求调剂
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 电转化DH5α感受态
已经有16人回复
- 感受态细胞的制备，是怎么分装
已经有4人回复
- 培养感受态大肠杆菌，请问长出来这样的菌株正常么？连续两天都是这样的（见图）
已经有10人回复
- 制感受态的氯化钙溶液
已经有12人回复
- 有没有人做过Inoue大肠杆菌超级感受态的啊。。求助啊！！！
已经有7人回复
- 毕赤酵母工程菌的保藏
已经有6人回复
- 处于感受态的微生物都没有细胞壁麽？
已经有4人回复
- 甘油管/斜面保藏法，甘油浓度多少合适？
已经有8人回复
- 大肠杆菌感受态加甘油至50%会不会对转化效率有影响？
已经有10人回复
- 父亲80了，尿频尿急想来看病
已经有16人回复
- 制作感受态细胞没有冰浴有影响吗？
已经有8人回复
- 【求助/交流】革兰氏阳性菌的感受态细胞制备和转化
已经有9人回复
- 【求助/交流】感受态细胞-80保存的时候加不加抗冻剂？加什么？加多少？谢谢！~~~~
已经有13人回复
- 【求助/交流】关于大肠杆菌感受态细胞保存的问题
已经有7人回复
- 【求助/交流】大肠杆菌冻存-55° 需要加甘油不 如果不加有什么后果
已经有20人回复
- 【求助/交流】大肠杆菌DH5α感受态细胞制备求助
已经有19人回复
- 电转化注意事项
已经有14人回复
molecula
铁杆木虫 (著名写手)
- MicEPI: 4
- 应助: 37 (小学生)
- 贵宾: 0.417
- 金币: 6397.2
- 散金: 1745
- 红花: 27
- 沙发: 34
- 帖子: 1709
- 在线: 602小时
- 虫号: 759184
- 注册: 2009-04-28
- 专业: 病原细菌与放线菌生物学
【答案】应助回帖
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+2, 端午节快乐，欢迎来微生物板块交流^_^ 2012-06-23 16:41:12
foxcl: 金币+1, ★★★★★最佳答案, 想知道如果最后一步50ul的山梨醇+50ul的50%甘油，再冷冻是否可行？有什么影响？ 2012-06-23 16:53:07
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+2, 端午节快乐，欢迎来微生物板块交流^_^ 2012-06-23 16:41:12
foxcl: 金币+1, ★★★★★最佳答案, 想知道如果最后一步50ul的山梨醇+50ul的50%甘油，再冷冻是否可行？有什么影响？ 2012-06-23 16:53:07
|
我的建议是 把做好的感受态的EP管放在大的50ml离心管中 在50ml离心管中装入甘油 然后放入-80 这样的方法好处有两个 第一 缓慢降温，更有利于感受态的效率 第二 最大效率防治冰晶产生 即便是超低温停电除了故障 外围的甘油也有一个缓慢升温的过程 这个是实验室小技巧 呵呵~  |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
lvye37074楼2012-06-23 11:24:25
2楼2012-06-23 09:51:11
青鸟7980
木虫 (小有名气)
- 应助: 8 (幼儿园)
- 金币: 2332.3
- 帖子: 228
- 在线: 222.6小时
- 虫号: 555722
- 注册: 2008-05-09
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
3楼2012-06-23 10:09:09
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+1, 鼓励发帖交流问题。 2012-06-23 22:06:06
foxcl: 金币+1, 谢谢。我摇瓶200mL做一次要2.5个小时，每次新鲜做会疯掉的。 2012-06-24 09:44:14
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+1, 鼓励发帖交流问题。 2012-06-23 22:06:06
foxcl: 金币+1, 谢谢。我摇瓶200mL做一次要2.5个小时，每次新鲜做会疯掉的。 2012-06-24 09:44:14
|
本帖内容被屏蔽 |
5楼2012-06-23 21:02:51
foxcl
铁虫 (正式写手)
- 应助: 28 (小学生)
- 金币: 2025.2
- 散金: 4
- 红花: 3
- 帖子: 359
- 在线: 60.4小时
- 虫号: 1257868
- 注册: 2011-04-07
- 专业: 微生物生理与生物化学
6楼2012-06-24 09:43:25
|
本帖内容被屏蔽 |
7楼2012-06-24 15:24:13
8楼2012-06-25 10:54:59
lihao1988903
金虫 (正式写手)
- 应助: 71 (初中生)
- 金币: 111.8
- 散金: 888
- 红花: 3
- 帖子: 773
- 在线: 75.7小时
- 虫号: 1603498
- 注册: 2012-02-07
- 性别: GG
- 专业: 微生物遗传育种学
9楼2012-06-25 11:00:22
jinpeng_6118
木虫 (正式写手)
- MicEPI: 2
- 应助: 28 (小学生)
- 金币: 5027
- 散金: 25
- 红花: 2
- 帖子: 856
- 在线: 147.9小时
- 虫号: 1019189
- 注册: 2010-05-15
- 性别: GG
- 专业: 微生物遗传学
LZ，请问GS115菌株（或者SMD1168）能交换或者寄点给我吗，最近用km71在做，表达效果不怎么样，所以想要点菌株，谢谢 10楼2012-06-25 15:15:41
