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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助：western blotting一抗有关问题
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喵汪

银虫 (小有名气)

[求助] 求助：western blotting一抗有关问题

做western blot时要先用一抗，再用HRP标记的二抗，
为什么不能直接用HRP标记的一抗呢？
还有，我试过了，先用金标一抗，再用HRP标记的二抗也做不出来，为什么一抗改成金标一抗就不行了呢？
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1楼 2012-06-20 23:17:10
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喵汪

银虫 (小有名气)
谢谢各位的回复，明白了。
可是还是想不通为什么金标的一抗做不出来？
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10楼2012-06-23 13:53:26
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Alisa_lin

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一抗用于识别你的目的蛋白，二抗识别一抗
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3楼2012-06-22 09:13:32
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Alisa_lin

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Alisa_lin at 2012-06-22 09:13:32
一抗用于识别你的目的蛋白，二抗识别一抗

二抗和一抗结合，并带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团），作用是检测一抗。  标记的是二抗吧
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4楼2012-06-22 09:20:22
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喵汪

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Alisa_lin at 2012-06-22 09:13:32
一抗用于识别你的目的蛋白，二抗识别一抗

为什么不能直接用HRP标记的一抗呢?先用金标一抗，再用HRP标记的二抗为什么也做不出来?
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5楼2012-06-22 21:06:25
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