| 查看: 465 | 回复: 4 | |||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
yuancying木虫 (小有名气)
|
[求助]
DNA序列产物
|
||
| 酵母的A基因的mRNA的核苷酸序列在NCBI上能检索到，请根据检索到的核苷酸序列，利用RNA提取、cDNA制备、引物设计、PCR扩增、琼脂糖凝胶电泳分离和DNA回收技术从酵母中获得该基因的DNA序列引物。 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜欢
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有134人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有15人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 功能基因扩增相关
已经有14人回复
- 【求助】用cDNA的ORF序列以基因组DNA为模板 做PCR 为何P不出其对应的基因组序列?
已经有8人回复
- 基因工程课程小结
已经有20人回复
- 得到DNA片段，如何推测产物
已经有13人回复
- 【求助/交流】DNA序列的校對
已经有9人回复
- 【求助/交流】求助基因克隆方面的问题解决方案
已经有17人回复
544534326
至尊木虫 (著名写手)
- 应助: 26 (小学生)
- 金币: 19353.6
- 散金: 60
- 红花: 7
- 帖子: 2320
- 在线: 244.7小时
- 虫号: 551252
- 注册: 2008-04-26
- 性别: GG
- 专业: 食品科学
打你 5楼2012-06-14 17:10:44
bbwalkman
木虫 (小有名气)
- MolEPI: 6
- 应助: 43 (小学生)
- 金币: 2334.5
- 红花: 3
- 帖子: 240
- 在线: 171.7小时
- 虫号: 1279904
- 注册: 2011-04-28
- 性别: GG
- 专业: 生化分析及生物传感
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+5, MolEPI+1, 很热心哦，鼓励正确解答问题 2012-06-13 17:18:26
yuancying: 金币+20, ★★★★★最佳答案, 非常感谢 2012-06-13 19:30:13
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+5, MolEPI+1, 很热心哦，鼓励正确解答问题 2012-06-13 17:18:26
yuancying: 金币+20, ★★★★★最佳答案, 非常感谢 2012-06-13 19:30:13
|
1.RNA提取：一般RNA提取的话，选择的是TRizol试剂，这个在Invitrogen就能买到，然后依次用氯仿，异丙醇和75％乙醇进行处理，然后紫外定量，进行保存。 2.cDNA制备：一般的cDNA第一条链的制备都是利用反转录酶和oligo dT进行实现的，通过oligo dT和你RNA poly（A）尾巴进行结合，然后在反转录酶（M-mlv还可以）进行第一条链的制备。 3.引物设计：根据你序列的长短，通过oligo 6和Premier primer 5两个软件进行设计。 4.PCR扩增：这就是普通的PCR扩增了，如果你的PCR序列比较长的话，建议你选取高保真的聚合酶，可以减少错配，另外，退火温度和循环数做几次实验就能摸索出来了。 5.琼脂糖凝胶电泳：这就是看你目的片段，选好胶的浓度，上样电泳就ok了，然后凝胶成像看看有没有条带就好了。 6.DNA切胶回收：一般都是有试剂盒的，可以按照试剂盒进行操作。 PS：这个扩增出来的DNA是通过mRNA为模板扩增出来的，应该是不包括原有DNA序列中内含子序列的，不知道你能不能用，祝好运！ |
2楼2012-06-13 15:36:02
 |
4楼2012-06-14 14:09:40
5