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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 碳水化合物 » DEAE-52纤维素柱求助
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guoyongyue

新虫 (初入文坛)

[求助] DEAE-52纤维素柱求助 已有2人参与

现在在做食用菌子实体多糖的分离纯化，我用的是DEAE-52的纤维素柱，用0.05到0.5的NaCl 梯度洗脱，1.25ml/min，上样量是1mg/ml 的多糖10ml，每管收集5ml，过了两次，也有峰，但是纯品太少，没办法富集，还想拿到纯品，怎么办呢？
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1楼 2012-06-13 10:09:29
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zhh8672

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
树树8013: 金币+2, 谢谢解答交流，欢迎常来咱们自己的板块转转。 2012-06-16 20:21:52
引用回帖:
6楼: Originally posted by guoyongyue at 2012-06-15 11:32:30
每次用一种洗脱液，都有一个峰。但是，我的样品很奇怪，形成的是多糖胶体似的，不是溶液，和水要经过强烈搅拌才和水溶解，不知道是什么东西。上样少了不能富集，多了又飘起来，飘在柱子顶端，我都愁死了...

这很正常，真菌多糖很多都是胶体，建议加热或盐溶液溶解，每次用一种洗脱液都有一个峰也很正常，主要是看哪个峰是主要成分，不知道你的柱子规格，一次进样10mg是有点少，需要很长时间才能得到足够的量啊，呵呵
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8楼2012-06-16 08:29:47
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hsd3521

主管区长 (知名作家)

火星驻地球联络处主任科员

优秀区长优秀版主优秀版主
非应助，自己也是在学习中，DE52不耐压，如果加大盐离子浓度可以不？不梯度洗脱，直接用一较高盐离子浓度洗脱液洗脱
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guoyongyue
太胖了！~
3楼2012-06-13 21:27:50
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guoyongyue

新虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by hsd3521 at 2012-06-13 21:27:50
非应助，自己也是在学习中，DE52不耐压，如果加大盐离子浓度可以不？不梯度洗脱，直接用一较高盐离子浓度洗脱液洗脱

好像不行~
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4楼2012-06-13 21:52:31
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zhh8672

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
guoyongyue: 金币+10, ★★★很有帮助, 有帮助 2012-06-15 11:29:45
有几个峰呢？建议从水开始，慢慢的把盐离子浓度增大，一般DEAE收集的组分可以将峰两边一起收集，只用这个填料很难得到高纯度的样品，还需要进一步的分离
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5楼2012-06-15 08:57:06
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