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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 【求助】有关DEAE装柱问题
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zcczj

铜虫 (正式写手)

[交流] 【求助】有关DEAE装柱问题

初来咋到的我现在用DEAE-纤维素纯化粗多糖，上玻璃柱，有关填料用量与所上样品的量之间该怎么样处理？
       还有这种填料装柱前预处理和装柱要求该怎么样。还有怎么样解决洗脱慢这个问题？需要做分级接收吗？谢谢了。
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1楼 2011-03-19 20:40:19
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jiaoyuanming

至尊木虫 (著名写手)
zcczj(金币+1): 谢谢 2011-05-18 23:21:19
先在网上百度google查一下吧！
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2楼2011-03-19 20:45:47
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worryseal

禁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
zcczj(金币+1): 非常感谢，请问你做过这方面的吗？想多了解下呢。 2011-05-18 23:21:10
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3楼2011-05-17 10:12:10
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worryseal

禁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
4楼2011-05-19 20:43:54
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回首天涯2015

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
（1）DE52阴离子交换剂干粉处理
先将100g的DE52阴离子交换剂干粉倒入250ml烧杯中，加入 150ml蒸馏水浸泡3h，去除杂质；再在150ml的0.5M的HCL溶液中浸泡1－2h,再用无离子水或蒸馏水洗至pH值中性或PH4以上，并将其在抽滤漏斗中抽干；将抽干的离子交换剂浸泡在150ml的0.5M的NaOH溶液中1－2h，再用无离子水或蒸馏水将其洗至中性。
(2)  DEAE－纤维素52装柱（2cm,50cm）
将层析柱清洗干净垂直固定到层析架上，加1/3体积的无离子水，打开下出液口，水流畅通，即刻将小烧杯中装有的柱材，轻轻倒入层析柱中，凝胶自然慢慢沉降再层析柱底部，凝胶沉积直到离层析柱上端1.5－2cm处，停止装柱，然后再用0.5M的NaOH淋洗2-3柱体积（约30ml），最后用水洗淋洗至流出液pH值显中性即可。
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5楼2015-08-12 09:52:18
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回首天涯2015

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我也在做这个，柱子是【1，60】的，用40g纤维素。
（1）DE52阴离子交换剂干粉处理
先将30g的DE52阴离子交换剂干粉倒入250ml烧杯中，加入 150ml蒸馏水浸泡3h，去除杂质；再在150ml的0.5M的HCL溶液中浸泡1－2h,再用无离子水或蒸馏水洗至pH值中性或PH4以上，并将其在抽滤漏斗中抽干；将抽干的离子交换剂浸泡在150ml的0.5M的NaOH溶液中1－2h，再用无离子水或蒸馏水将其洗至中性。
(2)  DEAE－纤维素52装柱（2cm,50cm）
将层析柱清洗干净垂直固定到层析架上，加1/3体积的无离子水，打开下出液口，水流畅通，即刻将小烧杯中装有的柱材，轻轻倒入层析柱中，凝胶自然慢慢沉降再层析柱底部，凝胶沉积直到离层析柱上端1.5－2cm处，停止装柱，然后再用0.5M的NaOH淋洗2-3柱体积（约30ml），最后用水洗淋洗至流出液pH值显中性即可。
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6楼2015-08-21 15:35:34
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小冰冰llp

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by 回首天涯2015 at 2015-08-21 15:35:34
我也在做这个，柱子是【1，60】的，用40g纤维素。
（1）DE52阴离子交换剂干粉处理
先将30g的DE52阴离子交换剂干粉倒入250ml烧杯中，加入 150ml蒸馏水浸泡3h，去除杂质；再在150ml的0.5M的HCL溶液中浸泡1－2h,再用 ...

哈哈，我也要做多糖了。大家可以交流交流，哈哈。
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7楼2015-08-26 15:56:32
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fang1226

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我买的DEAE-52不是干粉，是那种颗粒的，是20%乙醇保存的，我还需要碱酸碱的处理吗
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8楼2016-01-05 14:00:24
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