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【求助】有关DEAE装柱问题
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初来咋到的我现在用DEAE-纤维素纯化粗多糖,上玻璃柱,有关填料用量与所上样品的量之间该怎么样处理? 还有这种填料装柱前预处理和装柱要求该怎么样。还有怎么样解决洗脱慢这个问题?需要做分级接收吗?谢谢了。 |
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2楼2011-03-19 20:45:47
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zcczj(金币+1): 非常感谢,请问你做过这方面的吗?想多了解下呢。 2011-05-18 23:21:10
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zcczj(金币+1): 非常感谢,请问你做过这方面的吗?想多了解下呢。 2011-05-18 23:21:10
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3楼2011-05-17 10:12:10
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4楼2011-05-19 20:43:54
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(1)DE52阴离子交换剂干粉处理 先将100g的DE52阴离子交换剂干粉倒入250ml烧杯中,加入 150ml蒸馏水浸泡3h,去除杂质;再在150ml的0.5M的HCL溶液中浸泡1-2h,再用无离子水或蒸馏水洗至pH值中性或PH4以上,并将其在抽滤漏斗中抽干;将抽干的离子交换剂浸泡在150ml的0.5M的NaOH溶液中1-2h,再用无离子水或蒸馏水将其洗至中性。 (2) DEAE-纤维素52装柱(2cm,50cm) 将层析柱清洗干净垂直固定到层析架上,加1/3体积的无离子水,打开下出液口,水流畅通,即刻将小烧杯中装有的柱材,轻轻倒入层析柱中,凝胶自然慢慢沉降再层析柱底部,凝胶沉积直到离层析柱上端1.5-2cm处,停止装柱,然后再用0.5M的NaOH淋洗2-3柱体积(约30ml),最后用水洗淋洗至流出液pH值显中性即可。 |
5楼2015-08-12 09:52:18
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我也在做这个,柱子是【1,60】的,用40g纤维素。 (1)DE52阴离子交换剂干粉处理 先将30g的DE52阴离子交换剂干粉倒入250ml烧杯中,加入 150ml蒸馏水浸泡3h,去除杂质;再在150ml的0.5M的HCL溶液中浸泡1-2h,再用无离子水或蒸馏水洗至pH值中性或PH4以上,并将其在抽滤漏斗中抽干;将抽干的离子交换剂浸泡在150ml的0.5M的NaOH溶液中1-2h,再用无离子水或蒸馏水将其洗至中性。 (2) DEAE-纤维素52装柱(2cm,50cm) 将层析柱清洗干净垂直固定到层析架上,加1/3体积的无离子水,打开下出液口,水流畅通,即刻将小烧杯中装有的柱材,轻轻倒入层析柱中,凝胶自然慢慢沉降再层析柱底部,凝胶沉积直到离层析柱上端1.5-2cm处,停止装柱,然后再用0.5M的NaOH淋洗2-3柱体积(约30ml),最后用水洗淋洗至流出液pH值显中性即可。 |
6楼2015-08-21 15:35:34
7楼2015-08-26 15:56:32
8楼2016-01-05 14:00:24













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