| 查看: 2221 | 回复: 8 | ||||
[交流]
【求助】琼脂糖凝胶装柱问题
|
|
最近在用一个琼脂糖凝胶，给多糖分级。因为以前没有做过，没什么经验，柱子装了一个星期都没有装好，总是上样的时候，顺着避流下来，就一条色带。 我的装柱过程是这样的： 先将凝胶抽干（买来时20%乙醇浸泡的），用大概凝胶：水=3：1的水溶胀2h，最后搅拌程糊状，湿法装柱，静置沉降一夜。第二天用蠕动泵低流速（低于2ml/min，柱直径2.6cm）平衡柱子5h左右。然后湿法上样 请大家帮们分析，分析问题出在哪，怎么解决? 谢谢了 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 高分子检测 |
» 猜你喜欢
面上可以超过30页吧？
已经有13人回复
-
网上报道青年教师午睡中猝死、熬夜猝死的越来越多，主要哪些原因引起的？
已经有10人回复
-
为什么中国大学工科教授们水了那么多所谓的顶会顶刊，但还是做不出宇树机器人？
已经有13人回复
-
什么是人一生最重要的？
已经有8人回复
-
版面费该交吗
已经有17人回复
-
体制内长辈说体制内绝大部分一辈子在底层，如同你们一样大部分普通教师忙且收入低
已经有19人回复
-
【博士招生】太原理工大学2026化工博士
已经有8人回复
-
280求调剂
已经有4人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 【资料】分子生物学常见问题解答
已经有30人回复
- 【原创】原创之六：环境样品总DNA的提取与纯化【已搜索无重复】
已经有178人回复
- 【求助/交流】大家做蛋白纯化的都到什么型号柱子，效果怎么样呢
已经有10人回复
- 【资源】液相色谱常见问题及处理方法
已经有43人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
江西景德镇某大学接受调剂：环境科学与工程专业
+1/180
-
侯旭课题组(化学、化工、环境、能源相关方向)欢迎你的加入
+1/174
-
太原科技大学材料科学与工程学院招收金属材料类博士一名
+1/82
-
长春工业大学化学工程学院招收26年硕士调剂生
+1/80
-
26国自然面上，大家是否还写研究方案？
+1/71
-
西工大控制科学博后招聘
+1/42
-
招聘启事（酶工程与发酵工程方向）
+2/30
-
澳门理工大学人工智能智慧康养方向26 年9月入学博士招生 奖学金
+1/30
-
南京林业大学-国家级青年人才团队 招2026级申请考核制博士
+1/14
-
西安交通大学补亚忠课题组招聘统考硕士生
+2/14
-
邀稿综述，作者排名和工作量分工问题，存在不满和疑问。
+1/8
-
湖北工业大学2026年博士研究生（生物医药专博+轻工技术与工程学博）
+1/6
-
中国科学院金属研究所何杰团队招收2026年9月入学博士生（具有铝合金研究经验者优先）
+1/6
-
杨亚研究员课题组（广西大学-纳米能源研究中心）招收2026年物理学专业学术型博士
+1/6
-
青岛理工大学高端装备健康监测与智能运维团队接受调剂
+1/3
-
湖北工业大学2026年博士研究生（生物医药专博+轻工技术与工程学博）
+1/2
-
中科院合肥物质研究院招聘水系锌电博士后（长期有效）诚聘海内外优秀博士后
+1/2
-
矛盾的生活
+1/2
-
青岛科技大学高分子学院--让我们一起做有趣的研究
+1/2
-
青岛科技大学高分子学院--让我们一起做有趣的研究
+1/2
2楼2011-01-04 11:12:00
3楼2011-01-05 14:36:58
4楼2011-01-05 17:29:33
5楼2011-01-07 10:53:41
琼脂糖凝胶 装柱方法
★
karl2100(金币+1): 多谢提供！ 2011-01-26 15:56:38
karl2100(金币+1): 多谢提供！ 2011-01-26 15:56:38
|
在固定好的层析柱中加入约1/3体积的缓冲液，关闭柱出口，在柱顶部连续加入已经充分平衡好的琼脂糖凝胶（事先把凝胶调成流动性较好的糊状物），待凝胶沉降约3cm时打开出口，并连续加入糊状的凝胶，使其在形成的胶粒床面上连续均匀的沉降，直至凝胶完全沉降至适当的柱床体积为止。然后关闭出口，使上层有3cm高的缓冲液并在整个层析过程中一直维持，不能使柱子走空。为了防止柱床表面不会由于溶剂或样品的加入而引起搅动，要在柱床表面加一个保护装置，如圆形滤纸片或纱网等。 希望对你有帮助哈！ |
6楼2011-01-25 14:21:41
7楼2011-11-07 18:53:35
8楼2014-09-24 11:10:57
9楼2018-12-09 16:06:15