| 查看: 2207 | 回复: 8 | ||||
[交流]
【求助】琼脂糖凝胶装柱问题
|
|
最近在用一个琼脂糖凝胶，给多糖分级。因为以前没有做过，没什么经验，柱子装了一个星期都没有装好，总是上样的时候，顺着避流下来，就一条色带。 我的装柱过程是这样的： 先将凝胶抽干（买来时20%乙醇浸泡的），用大概凝胶：水=3：1的水溶胀2h，最后搅拌程糊状，湿法装柱，静置沉降一夜。第二天用蠕动泵低流速（低于2ml/min，柱直径2.6cm）平衡柱子5h左右。然后湿法上样 请大家帮们分析，分析问题出在哪，怎么解决? 谢谢了 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 高分子检测 |
» 猜你喜欢
有70后还继续奋斗在职场上的吗？
已经有5人回复
-
遇见不省心的家人很难过
已经有22人回复
-
博士延得我，科研能力直往上蹿
已经有5人回复
-
退学或坚持读
已经有25人回复
-
面上基金申报没有其他的参与者成吗
已经有4人回复
-
多组分精馏求助
已经有6人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 【资料】分子生物学常见问题解答
已经有30人回复
- 【原创】原创之六：环境样品总DNA的提取与纯化【已搜索无重复】
已经有178人回复
- 【求助/交流】大家做蛋白纯化的都到什么型号柱子，效果怎么样呢
已经有10人回复
- 【资源】液相色谱常见问题及处理方法
已经有43人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
哈尔滨工程大学青岛创新发展基地招聘青年教师
+1/509
-
多功能 电子微生物生长分析仪 及 微生物快检技术开发服务
+2/150
-
坐标浙江宁波，诚征女友
+1/79
-
结构动力学与结构健康监测方向欧盟玛丽居里全奖博士招聘
+1/78
-
博后平台选择
+1/63
-
娃娃们今儿考试喽。。。。
+1/61
-
深圳大学信息功能电子材料方向“申请-考核制”博士生招生
+2/48
-
上海市“光探测材料与器件”工程技术研究中心（上海应用技术大学）招聘优秀研究人员
+1/28
-
江西理工大学 稀土学院 稀土功能材料方向 招收2026届博士研究生、硕士研究生
+1/28
-
意大利华人老师University of Padova-全额奖学金博士
+1/11
-
温州医科大学招收特种医学博士研究生1名
+1/10
-
意大利米兰理工大学急聘CSC公派留学博士生（物理或无机材料科学方向）
+2/8
-
《中文期刊点评》这个模块，怎么不能点评期刊了呢自动跳转到主页了
+1/5
-
复旦大学化学系凡勇教授/张凡教授团队招聘博士后
+1/4
-
【博士后/科研助理招聘-北京理工大学-集成电路与电子学院-国家杰青团队】
+1/4
-
德国Karlsruhe Institute of Technology招收电化学储能及联合培养CSC博士等
+1/4
-
中山大学柔性电子学院黄维院士团队诚招博士后(柔性可穿戴电子或相关方向)
+1/3
-
华南理工大学宋波教授联合唐本忠院士招聘化学和材料方向博士后（长期有效）
+1/2
-
海南大学国家优青团队招聘“AI/大数据+材料”方向专任教师（事业编制）
+1/1
-
电子科技大学 电子科学与工程学院 杨青慧教授 2026年招博士研究生数名
+1/1
2楼2011-01-04 11:12:00
3楼2011-01-05 14:36:58
4楼2011-01-05 17:29:33
5楼2011-01-07 10:53:41
琼脂糖凝胶 装柱方法
★
karl2100(金币+1): 多谢提供！ 2011-01-26 15:56:38
karl2100(金币+1): 多谢提供！ 2011-01-26 15:56:38
|
在固定好的层析柱中加入约1/3体积的缓冲液，关闭柱出口，在柱顶部连续加入已经充分平衡好的琼脂糖凝胶（事先把凝胶调成流动性较好的糊状物），待凝胶沉降约3cm时打开出口，并连续加入糊状的凝胶，使其在形成的胶粒床面上连续均匀的沉降，直至凝胶完全沉降至适当的柱床体积为止。然后关闭出口，使上层有3cm高的缓冲液并在整个层析过程中一直维持，不能使柱子走空。为了防止柱床表面不会由于溶剂或样品的加入而引起搅动，要在柱床表面加一个保护装置，如圆形滤纸片或纱网等。 希望对你有帮助哈！ |
6楼2011-01-25 14:21:41
7楼2011-11-07 18:53:35
8楼2014-09-24 11:10:57
9楼2018-12-09 16:06:15