应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 【求助】琼脂糖凝胶装柱问题
91/1返回列表
查看: 2737  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

aloneever

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助】琼脂糖凝胶装柱问题

最近在用一个琼脂糖凝胶，给多糖分级。因为以前没有做过，没什么经验，柱子装了一个星期都没有装好，总是上样的时候，顺着避流下来，就一条色带。
我的装柱过程是这样的：
先将凝胶抽干（买来时20%乙醇浸泡的），用大概凝胶：水=3：1的水溶胀2h，最后搅拌程糊状，湿法装柱，静置沉降一夜。第二天用蠕动泵低流速（低于2ml/min，柱直径2.6cm）平衡柱子5h左右。然后湿法上样
请大家帮们分析，分析问题出在哪，怎么解决?
谢谢了
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

高分子检测

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-01-04 10:15:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aloneever

金虫 (正式写手)
这么快就沉了啊，顶到高手出现！
赞一下 回复此楼
2楼2011-01-04 11:12:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ylchen0902

金虫 (正式写手)
★
chzhbin(金币+1):给个红包，谢谢回帖交流 2011-01-05 14:45:37
aloneever(金币+2): 2011-01-05 17:26:52
胶要先溶胀好，脱气后再装柱子，上样后成一条线是因为你柱子没装好，柱效不好，平衡的时候静水压就可以，最好平衡一夜
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-01-05 14:36:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aloneever

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by ylchen0902 at 2011-01-05 14:36:58:
胶要先溶胀好，脱气后再装柱子，上样后成一条线是因为你柱子没装好，柱效不好，平衡的时候静水压就可以，最好平衡一夜

我用的是琼脂糖凝胶6FF，技术人员说这款凝胶不用溶胀的。买来就是20%乙醇浸泡的。是这么回事吗？ 我柱直径2.6，柱高大概35cm。静压流速大概0.5ml/min,特别慢，这正常吗？
赞一下 回复此楼
4楼2011-01-05 17:29:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ylchen0902

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by aloneever at 2011-01-05 17:29:33:

我用的是琼脂糖凝胶6FF，技术人员说这款凝胶不用溶胀的。买来就是20%乙醇浸泡的。是这么回事吗？ 我柱直径2.6，柱高大概35cm。静压流速大概0.5ml/min,特别慢，这正常吗？

一般所有的胶买来都是在20%乙醇保存的，你最好是在装柱子之前用你的流动相将乙醇置换出来，溶胀一下，以防止装柱子后再换流动相后胶会溶胀。像你说的这种柱子0.5的流速确实有点慢，你最好再重新装一下。还有一般多糖分级使用长点的柱子比较好（2.6*100cm）
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-01-07 10:53:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

henghuibio

新虫 (小有名气)

琼脂糖凝胶 装柱方法

★
karl2100(金币+1): 多谢提供！ 2011-01-26 15:56:38
在固定好的层析柱中加入约1/3体积的缓冲液，关闭柱出口，在柱顶部连续加入已经充分平衡好的琼脂糖凝胶（事先把凝胶调成流动性较好的糊状物），待凝胶沉降约3cm时打开出口，并连续加入糊状的凝胶，使其在形成的胶粒床面上连续均匀的沉降，直至凝胶完全沉降至适当的柱床体积为止。然后关闭出口，使上层有3cm高的缓冲液并在整个层析过程中一直维持，不能使柱子走空。为了防止柱床表面不会由于溶剂或样品的加入而引起搅动，要在柱床表面加一个保护装置，如圆形滤纸片或纱网等。

希望对你有帮助哈！
赞一下(2人) 回复此楼
6楼2011-01-25 14:21:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sdlj_2009

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
karl2100(金币+1): 多谢指教！ 2011-11-07 23:49:41
调糊也应注意。我是静置，倒出上清，加水摇起，静置倒出上清，几次后认为替换成水了。用胶体积与整体积的约为60%时，摇匀装柱较好，不浓也不希。
赞一下(3人) 回复此楼
7楼2011-11-07 18:53:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cchldu

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你的流速是用蠕动泵控制的吗？转速大概多少啊？
赞一下 回复此楼
8楼2014-09-24 11:10:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

清风明月～

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
请问琼脂糖凝胶如何装柱

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
9楼2018-12-09 16:06:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 aloneever 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 导师吐槽：我怎么摊上了这么个极品研究生！ +7 苏东坡二世 2026-08-23 7/350 2026-08-27 18:14 by 瞬息宇宙
[基金申请] 基金不中，共勉 +10 eulota 2026-08-26 10/500 2026-08-27 17:23 by lqllinqiaoli
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+5) +10 晴天加油 2026-08-26 11/550 2026-08-27 16:35 by msuhlx
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 我不理解！ +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 系统查不到 +10 董八千 2026-08-26 10/500 2026-08-26 16:30 by Equinoxhua
[基金申请] 怎么查啊 +5 huang1991js 2026-08-26 5/250 2026-08-26 16:09 by Equinoxhua
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合现在查不到了吗？ +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 明天应该可查了！？ +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 人气不行了 +11 fansofjerry 2026-08-21 11/550 2026-08-25 11:04 by 孤独的英雄6
[基金申请] 我面上完蛋了 +13 且听虎啸 2026-08-20 14/700 2026-08-25 09:10 by mrkang
[基金申请] 看来今天不会放榜了？ +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭