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【求助】琼脂糖凝胶装柱问题
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aloneever
金虫
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[交流]
【求助】琼脂糖凝胶装柱问题
最近在用一个琼脂糖凝胶,给多糖分级。因为以前没有做过,没什么经验,柱子装了一个星期都没有装好,总是上样的时候,顺着避流下来,就一条色带。
我的装柱过程是这样的:
先将凝胶抽干(买来时20%乙醇浸泡的),用大概凝胶:水=3:1的水溶胀2h,最后搅拌程糊状,湿法装柱,静置沉降一夜。第二天用蠕动泵低流速(低于2ml/min,柱直径2.6cm)平衡柱子5h左右。然后湿法上样
请大家帮们分析,分析问题出在哪,怎么解决?
谢谢了
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2011-01-04 10:15:57
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sdlj_2009
银虫
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★ ★
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+0.5
):给个红包,谢谢回帖
karl2100(金币+1): 多谢指教! 2011-11-07 23:49:41
调糊也应注意。我是静置,倒出上清,加水摇起,静置倒出上清,几次后认为替换成水了。用胶体积与整体积的约为60%时,摇匀装柱较好,不浓也不希。
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7楼
2011-11-07 18:53:35
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aloneever
金虫
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这么快就沉了啊,顶到高手出现!
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2楼
2011-01-04 11:12:00
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ylchen0902
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★
chzhbin(金币+1):给个红包,谢谢回帖交流 2011-01-05 14:45:37
aloneever(金币+2): 2011-01-05 17:26:52
胶要先溶胀好,脱气后再装柱子,上样后成一条线是因为你柱子没装好,柱效不好,平衡的时候静水压就可以,最好平衡一夜
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3楼
2011-01-05 14:36:58
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aloneever
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Originally posted by
ylchen0902
at 2011-01-05 14:36:58:
胶要先溶胀好,脱气后再装柱子,上样后成一条线是因为你柱子没装好,柱效不好,平衡的时候静水压就可以,最好平衡一夜
我用的是琼脂糖凝胶6FF,技术人员说这款凝胶不用溶胀的。买来就是20%乙醇浸泡的。是这么回事吗? 我柱直径2.6,柱高大概35cm。静压流速大概0.5ml/min,特别慢,这正常吗?
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4楼
2011-01-05 17:29:33
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