| 查看: 1627 | 回复: 6 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[求助]
大曲微生物的菌落计数法的详细步骤（包括药品的配制）
|
|||
| 我金币不多啊，谢谢帮助啊 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 无菌检查 |
» 猜你喜欢
求调剂
已经有23人回复
-
301求调剂
已经有15人回复
-
304求调剂（085602，过四级，一志愿985）
已经有17人回复
-
302分求调剂 一志愿安徽大学085601
已经有12人回复
-
288环境专硕,求调材料方向
已经有23人回复
-
环境专硕调剂
已经有6人回复
-
22408 调剂材料
已经有6人回复
-
285求调剂
已经有12人回复
-
求调剂
已经有6人回复
-
085600材料与化工301分求调剂院校
已经有19人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 做菌落计数实验，DMSO对大肠杆菌的抑制作用
已经有16人回复
- 菌落平板计数 菌落数差别大
已经有18人回复
- 都有哪些非培养的细菌计数方法？
已经有9人回复
- 大肠杆菌菌落形态请教
已经有29人回复
- 平板菌落计数问题
已经有7人回复
- 帮我推荐菌落计数器吧
已经有4人回复
- 土壤放线菌平板分离菌落计数的时候很微小的透明菌落要不要计？
已经有7人回复
- 菌落计数方法
已经有7人回复
- 细菌的计数方法
已经有7人回复
- 菌落总数计数的问题
已经有12人回复
- 谁能帮忙出一份食品微生物检测，菌落总数的练习题
已经有3人回复
- 平板计数法测定肠道菌群
已经有15人回复
- 【求助/交流】请问细菌计数的方法都有哪些种？
已经有11人回复
- 【求助/交流】微生物计数
已经有19人回复
- 【求助/交流】请教细菌菌落平板计数法结果不太理解
已经有17人回复
- 【求助/交流】请老师解答：菌落总数的问题？谢谢啦！
已经有7人回复
- 【求助/交流】关于微生物菌落的问题！！！！望各位赐教！
已经有8人回复
【答案】应助回帖
★ ★
东方苏六: 金币+2, ★有帮助 2012-06-12 21:16:03
东方苏六: 金币+2, ★有帮助 2012-06-12 21:16:03
|
微生物的菌落计数法应在洁净度100级的单向流空气区域内进行。检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染。 稀释液:pH7.0无菌氯化钠－蛋白胨缓冲液。 供试品制备方法如下：取供试品10g，加pH7.0无菌氯化钠－蛋白胨缓冲液至100ml，充分摇匀即可。 检查法： 1.平皿法：采用10倍递增稀释法对供试液进行逐步稀释，制备2～3个稀释级的供试液，每一稀释级每种培养基至少注2～3个平皿，注皿时，将1ml供试液慢慢全部注入平皿中，管内无残留液体，防止反流到吸管尖端部。阴性对照：用1支1ml吸管吸取稀释剂各1ml，分别注入4个平皿中。将预先配制好的霉菌、酵母菌计数用的玫瑰红钠琼脂培养基溶化，冷至约45℃，倾注上述各个平皿约15ml，以顺时针或逆时针方向快速旋转平皿，使供试液或稀释液与培养基混匀，放洁净工作台上待凝，凝固后于培养箱中倒置培养。 注意事项： 1.在作10倍递增稀释时，吸管插入第1级稀释液内不低于液面2.5cm，反复吸吹约10次。吸液时，应先吸至高于吸管上部刻度少许，然后提起吸管，贴于试管内壁，调整液面至刻度，吸管移至第2级稀释管的内壁近液面处（勿接触液面），缓慢地放出全部供试液，然后换另一吸管进行下一步稀释。 2.从低稀释级到高稀释级操作时，必须换吸管；从高稀释级到低稀释级操作时，可以使用同一支吸管。 3.供试液稀释及注皿时应振摇后取均匀供试液，以免造成实验误差。 方法二：薄膜过滤法： 1.取相当于每张滤膜含1g或1ml供试品的供试液直接过滤，或加至适量稀释剂中，混匀，过滤。若供试品每1g或1ml所含菌数较多时，可取适宜稀释级的供试液1ml，过滤。用pH7.0无菌氯化钠－蛋白胨缓冲液或其他适宜的冲洗液冲洗滤膜，冲洗方法和冲洗量要验证。冲洗后取出滤膜，菌面朝上贴于玫瑰红钠琼脂培养基平板上，倒置培养。至少制备一张滤膜。每片滤膜上的菌落数应不多于100个。如菌落数超过100个，不便计数时，可取高稀释级的供试液同法操作，点计滤膜上的菌落数。 2.阴性对照试验:取试验用的稀释液1ml，照上述滤膜过滤法操作，作为阴性对照。阴性对照不得有菌生长。 注意事项： 1.采用滤膜过滤法，滤膜孔径应不大于0.45μm，直径一般为50mm，使用时，保证滤膜在过滤前后的完整性。若采用其他直径的滤膜，冲洗量应进行相应的调整。 2.水溶性供试液过滤前先将少量的冲洗液过滤以湿润滤膜。油类供试品，其滤膜和过滤器在使用前应充分干燥。为发挥滤膜的最大过滤效率，应注意保持供试品溶液及冲洗液覆盖整个滤膜表面。供试液经薄膜过滤后，若需要用冲洗液冲洗滤膜，每张滤膜每次冲洗量为100ml。每片滤膜的总过滤量不宜过大，以避免滤膜上的微生物受损伤。 培养：23～28℃培养5～7天。 玫瑰红钠琼脂培养基：蛋白胨5.0g,磷酸二氢钾1.0g,玫瑰红钠0.0133g,硫酸镁0.5g,葡萄糖10.0g,琼脂14.0g. |
7楼2012-06-12 13:02:20
2楼2012-06-11 09:38:04
3楼2012-06-11 10:18:54
chenliangqiang
金虫 (小有名气)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 926
- 帖子: 252
- 在线: 229.5小时
- 虫号: 539336
- 注册: 2008-04-04
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
4楼2012-06-11 14:25:26
10