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无菌检查

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白发渔樵江渚上，古今多少事，都付笑谈中。

1楼2012-06-11 07:58:29

hqplar

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大曲是什么东东？本人不太明白，但是微生物的菌落计数方法有好几种，你选择哪种呢？

2楼2012-06-11 09:38:04

东方苏六

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2楼: Originally posted by hqplar at 2012-06-11 09:38:04
大曲是什么东东？本人不太明白，但是微生物的菌落计数方法有好几种，你选择哪种呢？

我也不知道用哪种啊，大曲就是粮酒的酒曲

白发渔樵江渚上，古今多少事，都付笑谈中。

3楼2012-06-11 10:18:54

chenliangqiang

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这个稀释涂平板啊
用不同的培养基培养

笨宝宝

4楼2012-06-11 14:25:26

东方苏六

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4楼: Originally posted by chenliangqiang at 2012-06-11 14:25:26
这个稀释涂平板啊
用不同的培养基培养

我想要的是具体的方案，谢谢

白发渔樵江渚上，古今多少事，都付笑谈中。

5楼2012-06-11 17:50:45

l68266152

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东方苏六: 金币+1, ★有帮助 2012-06-11 18:44:47

我建议你找本微生物实验的教材。因为，如果你要写论文的话，你可以说，我这个方法参考自某某教材，或某某文献，总不能参考某某论坛吧。。。

相信自己

6楼2012-06-11 18:44:13

hqplar

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东方苏六: 金币+2, ★有帮助 2012-06-12 21:16:03

微生物的菌落计数法应在洁净度100级的单向流空气区域内进行。检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染。
稀释液:pH7.0无菌氯化钠－蛋白胨缓冲液。
供试品制备方法如下：取供试品10g，加pH7.0无菌氯化钠－蛋白胨缓冲液至100ml，充分摇匀即可。
检查法：
1.平皿法：采用10倍递增稀释法对供试液进行逐步稀释，制备2～3个稀释级的供试液，每一稀释级每种培养基至少注2～3个平皿，注皿时，将1ml供试液慢慢全部注入平皿中，管内无残留液体，防止反流到吸管尖端部。阴性对照：用1支1ml吸管吸取稀释剂各1ml，分别注入4个平皿中。将预先配制好的霉菌、酵母菌计数用的玫瑰红钠琼脂培养基溶化，冷至约45℃，倾注上述各个平皿约15ml，以顺时针或逆时针方向快速旋转平皿，使供试液或稀释液与培养基混匀，放洁净工作台上待凝，凝固后于培养箱中倒置培养。
注意事项：
1.在作10倍递增稀释时，吸管插入第1级稀释液内不低于液面2.5cm，反复吸吹约10次。吸液时，应先吸至高于吸管上部刻度少许，然后提起吸管，贴于试管内壁，调整液面至刻度，吸管移至第2级稀释管的内壁近液面处（勿接触液面），缓慢地放出全部供试液，然后换另一吸管进行下一步稀释。
2.从低稀释级到高稀释级操作时，必须换吸管；从高稀释级到低稀释级操作时，可以使用同一支吸管。
3.供试液稀释及注皿时应振摇后取均匀供试液，以免造成实验误差。
方法二：薄膜过滤法：
1.取相当于每张滤膜含1g或1ml供试品的供试液直接过滤，或加至适量稀释剂中，混匀，过滤。若供试品每1g或1ml所含菌数较多时，可取适宜稀释级的供试液1ml，过滤。用pH7.0无菌氯化钠－蛋白胨缓冲液或其他适宜的冲洗液冲洗滤膜，冲洗方法和冲洗量要验证。冲洗后取出滤膜，菌面朝上贴于玫瑰红钠琼脂培养基平板上，倒置培养。至少制备一张滤膜。每片滤膜上的菌落数应不多于100个。如菌落数超过100个，不便计数时，可取高稀释级的供试液同法操作，点计滤膜上的菌落数。
2.阴性对照试验:取试验用的稀释液1ml，照上述滤膜过滤法操作，作为阴性对照。阴性对照不得有菌生长。
注意事项：
1.采用滤膜过滤法，滤膜孔径应不大于0.45μm，直径一般为50mm，使用时，保证滤膜在过滤前后的完整性。若采用其他直径的滤膜，冲洗量应进行相应的调整。
2.水溶性供试液过滤前先将少量的冲洗液过滤以湿润滤膜。油类供试品，其滤膜和过滤器在使用前应充分干燥。为发挥滤膜的最大过滤效率，应注意保持供试品溶液及冲洗液覆盖整个滤膜表面。供试液经薄膜过滤后，若需要用冲洗液冲洗滤膜，每张滤膜每次冲洗量为100ml。每片滤膜的总过滤量不宜过大，以避免滤膜上的微生物受损伤。
培养：23～28℃培养5～7天。
玫瑰红钠琼脂培养基：蛋白胨5.0g,磷酸二氢钾1.0g,玫瑰红钠0.0133g,硫酸镁0.5g,葡萄糖10.0g,琼脂14.0g.

7楼2012-06-12 13:02:20