| 查看: 2555 | 回复: 14 | |||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
蝈蝈1988木虫 (小有名气)
|
[求助]
融合pcr引物设计
|
||
|
哪位帮忙设计个融合引物啊？我最近设计的效果都很差啊，上下游目的融合片段是400bp左右就行。。。。麻烦各位了。纠结的很，都拖了好几个月了，木有进展啊。呜呜，拜托了。融合pcr的可行度是不是不高啊？ 上游 gaccg 4129921 cagcctcatc aaaattcgtt gaatccaaaa ggctatacat cttccgacgt tcagctctaa 4129981 tatctgccac gggtttctca tgcagacgtt gctttttcac taaatcccat atctgctggc 4130041 gttgctgctc tgttaagctg actccagcga agatacaact atagttatag ttacgttcat 4130101 cattcaggca ataactaacg ttattcttat taccatatgg catacaatat tgagagaagt 4130161 catccgcaat aacattatca gtaccagcag ttccagctaa agcatcggtt gccccaagaa 4130221 caaacattga cgctaaagcc aagattgcta tgttacgcat caaataattc ctcgctttct 4130281 cgaacagtac tattcgatgt cagtgcggat cactataacc ctgctgctgc aaactagcgt 4130341 cagagcatgt aaaagaacgt aaagttatgg aatagcaaag tttgttatcg tattttgctc 4130401 tcggaggaag aaaac 目的基因atgca taaaatctta ttagttgatg atgaccgtga actgacatcg 4130461 ctattaaaag agttgctcga gatggaagga ttcactgttg tgctcgctca tgatggcgaa 4130521 caggcattac aatatatcga ttcttcaatc gatctgctac tactggatat catgatgcca 4130581 cgtaaaaacg gcattgagac actaaaagag ctacgacaag accatcagac tcccgttatt 4130641 atgctaacgg cccgtggaag cgatttagac cgtgttctgg ggttagaact gggtgctgat 4130701 gattatcttc ctaagccgtt caatgatcgt gaactggtgg cccgtatacg tgcgatcctg 4130761 cgccgttcca actggagcga acaacaggct gatagtggga cacctgtact cgaggtcgat 4130821 aaactacagc tcaaccctgg gcggcaggaa gccagctttg acggtacaat tttggatctt 4130881 accggaacag aattcaccct gctttattta ttagcgcaac atttaggaca agtcgtttcc 4130941 cgcgaacact tgagtcagga agtcttggga aaacggttga caccctttga cagagccatt 4131001 gatatgcata tttccaacct gcgccgtaaa ttgccgaacc ggactgacga gttaccttgg 4131061 tttaagacat tacgcggtcg tggatactta atggtctctg caaaatga 下游tc aatagtttga 4131121 cagcccgtat ttttgcgatt ttctggctta cactggcgct cgtcctgatg gtggccttga 4131181 tggcaccaaa actggattca cggcaattga caccgctgtt ggacagtgaa tatcaacagg 4131241 gcatcatact cgcgaaacag atagaaaaag agttaacccg ctaccctgct aatgaactgt 4131301 tttggtggct acgactggat cgcgcaattg caaagtggac gccgccgggg caacttttac 4131361 tgctcgttac cagtgaagga cgtatcgttg atatccagac cagtgaaaag caggttgtcc 4131421 gtaacttcat tggtcaatcc aataatgcag atcatcccaa gaagaagaaa tatggtcgct 4131481 ctgaaatact cgggcccttt tctatccgcg atggtgaaga tcactaccag ctttacctca 4131541 ttaggcccgc aggtagcccc cagtctgact ttattaactt aatgtttgac cgaccccttt 4131601 tattacct |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有73人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 同源比对设计简并引物PCR产物测序不符！
已经有10人回复
- 全质粒PCR引物设计
已经有9人回复
- PCR引物设计的问题
已经有8人回复
- RT-PCR引物设计
已经有8人回复
- 重叠延伸PCR设计引物
已经有3人回复
- 如何设计重叠延伸PCR引物
已经有14人回复
- 【求助/交流】荧光定量PCR与半定量的RT－PCR在设计引物时有什么区别？
已经有8人回复
- 【求助/交流】引物设计信息如此，touchdownPCR如何设计？
已经有7人回复
- 【求助/交流】重叠PCR相关问题。
已经有8人回复
- 【求助/交流】pCR引物设计的详细规则
已经有7人回复
yuzhiming
捐助贵宾 (知名作家)
- MolEPI: 2
- 应助: 49 (小学生)
- 金币: 18071.4
- 散金: 4225
- 红花: 10
- 帖子: 7776
- 在线: 1218.1小时
- 虫号: 48471
- 注册: 2004-06-19
- 性别: GG
- 专业: 植物学研究的新技术、新方
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ...
小丹木木: 金币+3, MolEPI+1, 热心积极的虫虫，灰常欢迎来到分子版 2012-06-09 13:40:20
蝈蝈1988: 金币+10, ★有帮助 2012-06-14 16:32:22
蝈蝈1988: 金币+60, ★★★很有帮助, 暂时搞定了。。。。。。。嘿嘿嘿。。。。。。。。。。。乐啊。。。。。。。。。 2012-07-16 09:22:26
小丹木木: 金币+3, MolEPI+1, 热心积极的虫虫，灰常欢迎来到分子版 2012-06-09 13:40:20
蝈蝈1988: 金币+10, ★有帮助 2012-06-14 16:32:22
蝈蝈1988: 金币+60, ★★★很有帮助, 暂时搞定了。。。。。。。嘿嘿嘿。。。。。。。。。。。乐啊。。。。。。。。。 2012-07-16 09:22:26
|
1. PCR上游： UPstream-Forward：ACAAACATTGACGCTAAAGCC UPstream-Reverse：ATACGGGCTGTCAAACTATTGAGTTTTCTTCCTCCGAGAGC UPstream 产物序列（218bp）： ACAAACATTGACGCTAAAGCCAAGATTGCTATGTTACGCATCAAATAATTCCTCGCTTTCTCGAACAGTACTATTCGATGTCAGTGCGGATCACTATAACCCTGCTGCTGCAAACTAGCGTCAGAGCATGTAAAAGAACGTAAAGTTATGGAATAGCAAAGTTTGTTATCGTATTTTGCTCTCGGAGGAAGAAAACTCAATAGTTTGACAGCCCGTAT 2. PCR下游： LOWstream-Forward：GCTCTCGGAGGAAGAAAACTCAATAGTTTGACAGCCCGTAT LOWstream-Reverse：CAAAACAGTTCATTAGCAGGGTA LOWstream 产物序列(215bp) GCTCTCGGAGGAAGAAAACTCAATAGTTTGACAGCCCGTATTTTTGCGATTTTCTGGCTTACACTGGCGCTCGTCCTGATGGTGGCCTTGATGGCACCAAAACTGGATTCACGGCAATTGACACCGCTGTTGGACAGTGAATATCAACAGGGCATCATACTCGCGAAACAGATAGAAAAAGAGTTAACCCGCTACCCTGCTAATGAACTGTTTTG 3. 两个PCR片段分别回收，再合并作为模板，再用： UPstream-Forward: ACAAACATTGACGCTAAAGCC LOWstream-Reverse: CAAAACAGTTCATTAGCAGGGTA 两个引物扩增。即可以得到你要的除去目的基因的上下游片段。 UP+LOW stream产物序列（392 bp）： ACAAACATTGACGCTAAAGCCAAGATTGCTATGTTACGCATCAAATAATTCCTCGCTTTCTCGAACAGTACTATTCGATGTCAGTGCGGATCACTATAACCCTGCTGCTGCAAACTAGCGTCAGAGCATGTAAAAGAACGTAAAGTTATGGAATAGCAAAGTTTGTTATCGTATTTTGCTCTCGGAGGAAGAAAACTCAATAGTTTGACAGCCCGTATTTTTGCGATTTTCTGGCTTACACTGGCGCTCGTCCTGATGGTGGCCTTGATGGCACCAAAACTGGATTCACGGCAATTGACACCGCTGTTGGACAGTGAATATCAACAGGGCATCATACTCGCGAAACAGATAGAAAAAGAGTTAACCCGCTACCCTGCTAATGAACTGTTTTG PCR产物（392bp）连入载体，测序后即可。中间去除了目标基因！ |
9楼2012-06-09 11:00:18
yuzhiming
捐助贵宾 (知名作家)
- MolEPI: 2
- 应助: 49 (小学生)
- 金币: 18071.4
- 散金: 4225
- 红花: 10
- 帖子: 7776
- 在线: 1218.1小时
- 虫号: 48471
- 注册: 2004-06-19
- 性别: GG
- 专业: 植物学研究的新技术、新方
2楼2012-06-08 11:24:14
蝈蝈1988
木虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 3139.6
- 散金: 33
- 红花: 2
- 帖子: 126
- 在线: 85.6小时
- 虫号: 1247014
- 注册: 2011-03-27
- 性别: MM
- 专业: 植物病理学
3楼2012-06-08 11:33:12
蝈蝈1988
木虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 3139.6
- 散金: 33
- 红花: 2
- 帖子: 126
- 在线: 85.6小时
- 虫号: 1247014
- 注册: 2011-03-27
- 性别: MM
- 专业: 植物病理学
4楼2012-06-08 11:50:04
